全生育期整株黄化玉米新材料的遗传分析及其基因定位

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玉米是全球范围内最重要的饲料来源和粮食作物之一,开展玉米叶绿素合成或降解途径相关变异基因的定位克隆及其突变体作用机理等方而的研究,对于作为C。植物的模式植物-玉米的光合作用机理等方面以及丰富玉米叶色突变体库具有重要的理论意义。本研究以一份玉米黄化材料yglm1为对象,该材料植株茎秆纤细,叶片柔嫩细长,黄化程度较高,植株整体表现为黄化,且黄化现象维持在玉米的整个生育期,可正常生长并结实,但杂交群体F2代的黄化株存在返绿现象。本研究通过组配不同的杂交组合,以期研究黄化材料的遗传特性,并利用SSR标记技术黄化基因进行分子标记定位研究。以正常玉米自交系为母本,黄花材料为父本,分别组配了三个杂交群体Mol7×yglm1及RP128×yglm1,Fl自交得到F2代种子。调查F1代以及F2代叶色的表现,发现三个杂交F1代植株均表现为正常绿色,但F2代出现正常绿与黄化的叶色性状分离。其中杂交组合478×yglm1, Mo17×yglm1的F2代分别种植2679株和1962株,经卡方检验,正常绿与黄化的分离比均符合3:1分离比例,符合孟德尔关于一对隐性核基因的遗传规律;而杂交组合RP128×yglm1的F2代种植群体大小为1687株,其正常绿株与黄化株的分离比约为16:1,经卡方检验,不符合孟德尔关于两对隐性核基因的遗传。由于本黄化材料yglm1无相应的野生型,因此以正常自交系478和黄化材料yglm1杂交组合的F2代作为定位群体。运用分子标记SSR技术,首先在亲本478与yglm1之间筛选多态性的引物,在分布于玉米10条染色体上的1270对SSR引物中,共计筛选到表现出多态性的引物169对。其中位于1号染色体的多态性引物41对,2号染色体20对,3号染色体1 8对,4号染色体20对,5号染色体12对,6号染色体16对,7号染色体9对,8号染色体1 8对,9号染色体12对,1 0号染色体3对,说明该黄化突变体yglm1与正常自交系478的之间的多态性主要存在于这些引物之间。然后用黄化和绿色两个基因池再次筛选在亲本478与yglm1之间表现出多态性的169对引物,黄化基因池由随机选取yglm1的F2代20个黄化单株的DNA组成,绿基因池由随机选取yglm1的F2代的20个正常绿株的DNA组成。然后用478×yglm1杂交群体的F2代的黄化单株共532株进行连锁分析,最终确定第9染色体的3对引物umc2337、umc1586和umc1492与目标基因表现为连锁关系。因此将黄化基因定位在第9染色体的短臂上,位于标记umc2337与umc1586之间,与目标基因的遗传距离分别为2.9cM和3.8cM。综上所述,本材料为全生育期整株黄化,可稳定遗传,受隐性基因控制。不同杂交F2代黄化与绿色植株分离比例存在明显差异,有些为3:1,有些接近16:1。说明该黄化材料的遗传机制较为复杂。利用SSR标记技术,已初步将该黄化基因定位在玉米第9染色体上。
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