RECK在盆腔脏器脱垂患者盆底组织中子宫主韧带和阴道前壁中表达意义的研究

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目的:检测女性盆腔脏器脱垂(pop)患者子宫主韧带和阴道前壁中RECK的表达,探讨其表达变化与POP发生发展的关系。   材料与方法:   一、材料   40例POP患者的主韧带、膨出阴道前壁组织及10例非脱垂患者的主韧带及阴道前壁组织来自2009年3月到2010年3月间中国医科大学附属盛京医院妇科手术切除的组织。所有组织均经福尔马林固定,常规石蜡包埋。   二、主要试剂   兔抗人RECK单克隆抗体购自武汉博士德公司。S-P试剂盒及DAB显色试剂盒均购自北京中杉金桥生物公司。   三、方法   采用免疫组织化学染色方法,按链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(S-P)法行免疫组织化学染色。切片常规脱蜡至水,高温高压进行抗原修复,一抗4℃孵育过夜,DAB显色,苏木素复染。用PBS代替一抗作为阴性对照。结果判定:细胞外基质内见棕黄色颗粒为阳性表达。评分标准:应用计算机图像分析仪分析各组RECK免疫组织化学染色的阳性区平均灰度值。在图像分析中,免疫组织化学染色的强弱与灰度值成正比关系,阳性物质越高,染色越深,灰度值越大。   四、统计学分析   采用SPSS13.0软件包进行统计学处理。RECK蛋白表达和POP临床病理特征的关系用t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。   结果:RECK在盆底组织的表达阳性呈黄色或棕黄色,主要定位于细胞外基质,阳性表达呈弥漫性分布,POP组和对照组患者盆底组织中均见RECK阳性表达,RECK在对照组的主韧带及阴道壁平均灰度值(90.7±2.90;90.3士3.84)明显高于Ⅱ度、Ⅲ度和Ⅳ度盆腔脏器脱垂患者(86.4士3.44,82.2±3.20,81.9±3.06;86.1士4.35,81.3士4.04,80.2士2.66),差异有统计学意义;在对照组的平均灰度值与Ⅰ度盆腔脏器脱垂者的平均灰度值未见明显差异;Ⅲ度和Ⅳ度盆腔脏器脱垂患者中的主韧带及阴道壁平均灰度值(82.2±3.20,81.9±3.06;81.3±4.04,80.2±2.66)明显低于Ⅰ度和Ⅱ度盆腔脏器脱垂者的平均灰度值(90.2±3.66,86.4±3.44;89.9士3.75,86.1±4.35),差异有统计学意义。而RECK蛋白表达与患者绝经状态及阴道分娩次数无关。   结论:POP患者盆底结缔组织RECK蛋白表达降低,并与脱垂程度相关,与患者是否绝经及阴道分娩次数无关。
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