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目的：探讨表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒（RecombinantNewcastleDiseaseVirusexpressingtherabiesvirusglycoprotein,rL-RVG）通过乙酰胆碱受体诱导胃癌细胞凋亡、抑制其迁移的可能机制。
方法：将对数增殖期的胃癌细胞株SGC随机分成重组新城疫病毒rL-RVG组、新城疫病毒（NewcastleDiseaseVirus,NDV）组、PBS组，并同时分别设烟碱型乙酰胆碱受体（Alpha7nicotinicacetylcholinereceptor，α7-nAChR）抑制剂MLA（Methyllcaconitinecitrate，MLA）、激动剂ACB（Acetylcholinebromide，ACB）、si-RNA以及ERK通路抑制剂corynoxeine预处理组。病毒感染24h，CCK-8法及克隆形成实验测定rL-RVG对SGC细胞株活力、增殖影响，蛋白印迹法检测狂犬病毒蛋白（Rabiesvirusglycoprotein，RVG）、NDV-HN糖蛋白、α7-nAChR的表达；凋亡蛋白cleved-caspase3、BAX/BCL-2的表达；通路蛋白P-MEK、MEK、P-ERK、ERK的表达；上皮间质转化（Epithelialmesenchymaltransition,EMT）相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin的表达。免疫荧光法测定P-ERK、E-cadherin表达水平；划痕实验和Transwell实验检测rL-RVG对SGC迁移的影响；胃癌SGC细胞裸鼠皮下移植瘤实验检测rL-RVG、NDV对SGC皮下移植瘤生长影响。
结果：
1、rL-RVG感染胃癌细胞SGC后，CCK-8结果表明，随着病毒稀释倍数的增加，细胞活力也增高，rL-RVG、NDV分别在10-2、10-3时细胞活力＞80%。克隆形成实验结果表明rL-RVG、NDV较PBS组抑制SGC增殖，且rL-RVG组抑制增殖作用更显著。Westernblot结果显示SGC细胞稳定表达狂犬病毒糖蛋白RVG、新城疫病毒蛋白NDV-HN，表明rL-RVG、NDV成功感染SGC细胞。
2、Westernblot结果显示α7-nAChR蛋白、凋亡相关蛋白（clevedcaspase3、BAX/BCL-2）及E-cadherin蛋白表达水平在rL-RVG组、NDV组中较PBS组表达上调，且rL-RVG组上调明显；rL-RVG组及NDV组的EMT相关蛋白（N-cadherin、Vimentin）、ERK通路蛋白（P-MEK/MEK、P-ERK/ERK）的表达水平较PBS组明显下调，且rL-RVG组较NDV组下调显著。ACB预处理组较未处理组α7-nAChR蛋白、ERK通路蛋白（P-MEK/MEK、P-ERK/ERK）及Vimentin、N-cadherin蛋白表达水平上调，E-cadherin蛋白表达水平下调；MLA、si-RNA及corynoxeine预处理组较未处理组α7-nAChR蛋白、ERK通路蛋白（P-MEK/MEK、P-ERK/ERK）及Vimentin、N-cadherin蛋白表达水平下调，E-cadherin蛋白表达水平上调。
3、免疫荧光结果提示E-caherin蛋白在rL-RVG组、NDV组中较PBS组表达上调，且rL-RVG组上调明显，ACB预处理组较未处理组E-cadherin蛋白表达水平下调，MLA、si-RNA及corynoxeine预处理组较未处理组E-cadherin表达水平上调；通路蛋白P-ERK在rL-RVG组、NDV组中较PBS组表达下调，且rL-RVG组下调明显，ACB预处理组较未处理组表达水平上调，MLA、si-RNA及corynoxeine预处理组较未处理组表达水平下调。
4、划痕实验及Transwell实验结果表明，rL-RVG组及NDV组较PBS组抑制胃癌细胞迁移，rL-RVG较NDV组及PBS组抑制迁移作用更明显，ACB预处理组较未处理组抑制迁移作用减弱，在加入MLA、si-RNA及corynoxeine预处理组较未预处理组病毒抑制迁移作用明显增强。
5、SGC皮下移植瘤实验结果显示，rL-RVG、NDV抑制皮下瘤的生长，rL-RVG较NDV对皮下瘤生长抑制作用明显。
结论：rL-RVG可能通过α7-nAChR抑制ERK通路诱导胃癌细胞凋亡；rL-RVG通过α7-nAChR抑制ERK-EMT抑制胃癌细胞SGC的迁移。
方法：将对数增殖期的胃癌细胞株SGC随机分成重组新城疫病毒rL-RVG组、新城疫病毒（NewcastleDiseaseVirus,NDV）组、PBS组，并同时分别设烟碱型乙酰胆碱受体（Alpha7nicotinicacetylcholinereceptor，α7-nAChR）抑制剂MLA（Methyllcaconitinecitrate，MLA）、激动剂ACB（Acetylcholinebromide，ACB）、si-RNA以及ERK通路抑制剂corynoxeine预处理组。病毒感染24h，CCK-8法及克隆形成实验测定rL-RVG对SGC细胞株活力、增殖影响，蛋白印迹法检测狂犬病毒蛋白（Rabiesvirusglycoprotein，RVG）、NDV-HN糖蛋白、α7-nAChR的表达；凋亡蛋白cleved-caspase3、BAX/BCL-2的表达；通路蛋白P-MEK、MEK、P-ERK、ERK的表达；上皮间质转化（Epithelialmesenchymaltransition,EMT）相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin的表达。免疫荧光法测定P-ERK、E-cadherin表达水平；划痕实验和Transwell实验检测rL-RVG对SGC迁移的影响；胃癌SGC细胞裸鼠皮下移植瘤实验检测rL-RVG、NDV对SGC皮下移植瘤生长影响。
结果：
1、rL-RVG感染胃癌细胞SGC后，CCK-8结果表明，随着病毒稀释倍数的增加，细胞活力也增高，rL-RVG、NDV分别在10-2、10-3时细胞活力＞80%。克隆形成实验结果表明rL-RVG、NDV较PBS组抑制SGC增殖，且rL-RVG组抑制增殖作用更显著。Westernblot结果显示SGC细胞稳定表达狂犬病毒糖蛋白RVG、新城疫病毒蛋白NDV-HN，表明rL-RVG、NDV成功感染SGC细胞。
2、Westernblot结果显示α7-nAChR蛋白、凋亡相关蛋白（clevedcaspase3、BAX/BCL-2）及E-cadherin蛋白表达水平在rL-RVG组、NDV组中较PBS组表达上调，且rL-RVG组上调明显；rL-RVG组及NDV组的EMT相关蛋白（N-cadherin、Vimentin）、ERK通路蛋白（P-MEK/MEK、P-ERK/ERK）的表达水平较PBS组明显下调，且rL-RVG组较NDV组下调显著。ACB预处理组较未处理组α7-nAChR蛋白、ERK通路蛋白（P-MEK/MEK、P-ERK/ERK）及Vimentin、N-cadherin蛋白表达水平上调，E-cadherin蛋白表达水平下调；MLA、si-RNA及corynoxeine预处理组较未处理组α7-nAChR蛋白、ERK通路蛋白（P-MEK/MEK、P-ERK/ERK）及Vimentin、N-cadherin蛋白表达水平下调，E-cadherin蛋白表达水平上调。
3、免疫荧光结果提示E-caherin蛋白在rL-RVG组、NDV组中较PBS组表达上调，且rL-RVG组上调明显，ACB预处理组较未处理组E-cadherin蛋白表达水平下调，MLA、si-RNA及corynoxeine预处理组较未处理组E-cadherin表达水平上调；通路蛋白P-ERK在rL-RVG组、NDV组中较PBS组表达下调，且rL-RVG组下调明显，ACB预处理组较未处理组表达水平上调，MLA、si-RNA及corynoxeine预处理组较未处理组表达水平下调。
4、划痕实验及Transwell实验结果表明，rL-RVG组及NDV组较PBS组抑制胃癌细胞迁移，rL-RVG较NDV组及PBS组抑制迁移作用更明显，ACB预处理组较未处理组抑制迁移作用减弱，在加入MLA、si-RNA及corynoxeine预处理组较未预处理组病毒抑制迁移作用明显增强。
5、SGC皮下移植瘤实验结果显示，rL-RVG、NDV抑制皮下瘤的生长，rL-RVG较NDV对皮下瘤生长抑制作用明显。
结论：rL-RVG可能通过α7-nAChR抑制ERK通路诱导胃癌细胞凋亡；rL-RVG通过α7-nAChR抑制ERK-EMT抑制胃癌细胞SGC的迁移。