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目的:观察salubrinal对人口腔鳞癌细胞内质网应激通路(endoplasmic reticulum stress ERS)NF-κB–HIF-1α活化的影响,并检测其调控凋亡标志蛋白cleaved PARP的表达,探讨salubrinal影响人口腔鳞癌细胞放射敏感性的作用机制。方法:构建口腔鳞癌细胞KB对应放射抗拒口腔癌细胞KBR(4 Gy/次,1次/7-10天,共4次);克隆形成实验检测salubrinal预处理后口腔癌细胞放射敏感性;流式细胞仪检测control组、salubrinal组、IR组和IR+salubrinal组细胞凋亡分数;采用Western Blot检测4 Gy X射线照射后不同时间点(0 min、20 min、1 h、3 h、6h、12 h、24 h和48 h)口腔癌细胞NF-κB–HIF-1α信号通路活化情况;检测salubrinal预处理后(20μmol/L,12 h)射线诱导口腔癌细胞NF-κB–HIF-1α通路活化情况及凋亡标志蛋白cleaved PARP的表达;应用放射自显影技术进行蛋白条带的显影。Image J图像分析系统分析结果。结果:1.克隆形成实验示salubrinal增加口腔癌细胞放射敏感性,KB及KBR细胞放射增敏比分别为1.19和1.24。2.细胞凋亡检测结果提示与IR组相比,salubrinal增加射线诱导的人口腔鳞癌细胞凋亡,差异有统计学意义(t=0.72、5.86,P<0.05)。3.Western Blot结果示,射线照射后1-3 h诱导口腔癌KB细胞phosphop65、HIF-1α表达增加;照射后6 h达高峰,与空白对照组比较具有统计学意义(t=16、4.73,P<0.05)。而相应放射抗拒细胞KBR则于照射后6-12 h,phospho-p65、HIF-1α蛋白表达增加;照射后24 h达峰,与空白对照组比较,差异具有统计学意义(t=8.33、5.97,P<0.05)。提示射线诱导口腔癌细胞NF-κB–HIF-1α细胞活化具有时间依赖性,而salubrinal抑制射线诱导其异常活化。4.此外,Salubrinal增加射线诱导口腔癌细胞凋亡标志蛋白cleaved PARP表达及凋亡指数,而NF-κB激活剂TNF-α逆转了这一作用,提示salubrinal通过抑制NF-κB活化增加射线调控口腔癌细胞凋亡。5.进一步应用NF-κB抑制剂Bay11-7082同样增加射线诱导口腔癌细胞凋亡,KB及KBR细胞系Bay11-7082+IR组cleaved PARP的表达为2.67±0.26、1.91±0.17,IR组为2.1±0.16、1.44±0.15,差异有统计学意义(t=1.85、2.11,P<0.05)。结论:Salubrinal抑制射线诱导NF-κB活化增加射线诱导口腔癌细胞凋亡进而调控口腔癌细胞放射敏感性。