谷氨酰胺在冷应激雏鸡肺损伤中保护作用的研究

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寒冷是北方寒区动物最普遍的应激原,寒冷应激所引起的动物生长缓慢、抗病性差、甚至死亡是制约北方畜牧业和养殖业发展的主要因素之一。谷氨酰胺(Gln)具有抗应激、抗感染、抗疲劳、抗氧化、增强免疫能力等功能。它作为一种饲料添加剂在畜牧业中已得到广泛的应用。目前,Gln的抗应激作用在禽类当中的研究还比较少,进一步深入研究Gln在家禽体内的生化代谢过程,特别是Gln对应激状态下的禽类维持正常生理功能的作用是非常必要的。本试验以500只伊莎雏鸡为研究对象,共分为正常组、应激组、(Gln)低剂量组、(Gln)中剂量组、(Gln)高剂量组5个实验组。通过临床症状、剖检变化及肺组织光镜和电镜下的病理学变化的观察,肺脏水肿程度、抗氧化功能、炎症反应、以及内源性保护基因HO-1和HSP70的表达等方面的检测,研究了Gln对冷应激致雏鸡肺损伤的保护作用。研究结果表明:1.通过HE染色、透射电镜观察,从形态学证实了Gln对冷应激致雏鸡肺损伤具有一定的保护作用。2.通过对肺脏W/D的检测,结果表明Gln能够有效地减轻冷应激致雏鸡肺脏的水肿程度,改善肺微循环状况,减轻肺部病理损伤。3.通过对血清和肺组织中GSH-Px、SOD活性以及MDA、蛋白质羰基含量和DNA交联率的检测,结果显示Gln具有抗氧化作用,能明显抑制冷应激引起的氧化-抗氧化平衡失调;能使肺组织蛋白质羰基含量接近于正常水平;肺组织细胞DNA交联率趋于正常。证明Gln影响抗氧化系统功能是其发挥对冷应激致雏鸡肺损伤的保护效应的途径之一。4.通过对肺组织MPO活性,IL-1β和IL-2 mRNA表达的检测,结果显示Gln可能通过抑制肺组织MPO活性,抑制促炎因子IL-1β和IL-2的基因表达而发挥了对冷应激致雏鸡肺损伤的保护效应。5.通过对血清和肺组织中Gln含量的检测,结果显示冷应激条件下,雏鸡血浆和肺组织中Gln浓度降低,适量的Gln使得冷应激雏鸡血浆和肺组织中的Gln浓度相对趋于正常,有利于机体的适应性反应。6.应用TUNEL法检测雏鸡肺细胞凋亡的检测,结果证实Gln能明显抑制冷应激所致雏鸡肺组织细胞的凋亡,从而有效的保护了肺组织。7.运用RT-PCR方法检测肺组织HO-1和HSP70 mRNA的表达,结果显示Gln能促进肺组织HO-1和HSP70 mRNA的表达,提示Gln可通过加强机体的内源性保护来减轻冷应激所导致的肺损伤。本试验通过对冷应激雏鸡抗氧化功能、炎症反应、以及内源性保护基因表达量等指标的测定,揭示Gln可以减轻冷应激导致的雏鸡肺部损伤,对冷应激具有一定的拮抗作用。为今后解决冷应激给畜牧业生产所造成的负反应提供一定的理论基础和实验依据。
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