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本实验以根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)为介导,利用拟南芥(Arabidopsis thaliana)作为受体植物进行胡杨基因大片段的大规模转化。主要实验结果如下:1、本实验目前共将1884个根癌农杆菌进行了活化实验,其中有1570个农杆菌活化成功,OD600介于0.8-1之间,活化成功率为83.33%。2、将活化后的1570个胡杨(PopuLus euphratica Oliv.) BIB AC克隆进行了拟南芥转化,抗生素平板筛选转基因T1代,得到了抗性转基因拟南芥株系590个。3、对转基因T2代590个株系播种,采集幼苗利用Tissue Lyser结合CTAB法提取DNA,并采用微量紫外分光光度计检测其纯度,统计得到A260/280(排除酚类物质、RNA、碳水化合物、多肽等的污染对DNA纯度的影响)比值介于1.8-2.0之间的株系共521个。4、将以上521个T2代拟南芥进行PCR检测,采用NPTII基因为引物进行目标条带的扩增,目标条带540 bp,共得到403株阳性植株。5、实验用卡那霉素平板播种观察法,对所得到的部分转化子共119个进行纯合子筛选实验,分离得到T2纯合系49个,纯合子的比例为41.18%。6、对分离得到的49个纯和系进行耐盐初筛实验(NaC1浓度150mM),共得到11个有耐盐表现的株系;进一步验证试验证实(NaC1浓度150 mM和175 mM),有2个株系具有稳定的耐盐表现。7、对11个有耐盐性的株系播种后进行NaCl水溶液处理,在对相对含水量的测定时发现有3个株系在50、100、150 mM NaC1处理时RWC (Relative Water Content)均接近90%;培养基培养发现此耐盐株系的最大耐盐浓度为150mM,而土壤播种研究中也发现,在盐梯度处理转基因幼苗时,200mM盐处理1次就会导致生长停滞,说明此耐盐株系的最大耐盐浓度为150mM。8、在盐梯度处理时还得到了2个表型发生变化的突变体。本研究主要采集额济纳地区胡杨并对其基因资源进行耐盐能力分析,通过对其生长环境、生活习性的深入了解,结合BIBCA文库技术将胡杨基因随机大片段利用花序浸泡转化法转入拟南芥中表达,利用拟南芥自身的优势来筛选、鉴定转入的胡杨基因功能,这对于解析胡杨的耐盐机理及挖掘胡杨耐盐基因资源具有重要意义。这不仅丰富胡杨耐盐方面的研究内容,同时,对其他植物耐盐性的研究提供了可以借鉴的依据。