猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的以母猪繁殖障碍、各种年龄猪的呼吸症状和仔猪的高死亡率为特征的病毒性疾病。该病现已遍及世界各地，给全球养猪业造成巨大的经济损失。 本研究用猪繁殖与呼吸综合征活疫苗对健康家兔进行三次免疫接种，以获取兔抗PRRSV高免血清，再将抗血清经饱和硫酸铵盐析法和ProteinG亲和层析法提纯，制得兔抗PRRSV IgG。之后采用免疫组织化学Envision法，以兔抗PRRSV IgG为第一抗体，原位检测患病猪主要感染组织中的PRRSV，并对肺组织中的病毒抗原进行定位、定性和定量检测，构建了PRRSV的Envision法诊断体系。 经SDS-PAGE和Western-blotting试验证明，本试验制得的兔抗PRRSV IgG具有高纯度和良好的特异性，其最佳工作浓度为1：200。肺组织为PRRSV的最佳检测组织。肺组织PRRSV定位研究发现，阳性表达主要出现在肺巨噬细胞、肺泡上皮细胞和支气管黏膜上皮细胞的胞浆内，呈棕黄色。本实验建立的诊断标准为：在光镜400倍镜下，每10个视野平均阳性细胞数＞60为强阳性病例，在30～59之间为阳性病例，＜29为阴性病例。该诊断方法对30例临床待检病例的阳性检出率为76.7％，远远高于间接ELISA诊断阳性检出率33.3％，与临床症状和剖检变化更为吻合。 综合以上结果表明，Envision法可以对组织中的PRRSV进行定位、定性和定量诊断，具有特异、直观、敏感和便捷的特点。肺脏和肺巨噬细胞是Envision法诊断PRRSV的最佳对象。本研究构建的免疫组织化学诊断体系，不但可以对PRRSV进行实验室鉴别诊断，也能广泛应用于基层兽医单位，及时明确诊断抗原，提高临床确诊率，更快速有效地防制该病、减少经济损失。同时本研究成果也将为其他多种畜禽病毒性疾病的诊断提供新的思路和手段。