【摘 要】
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本研究构建了韩国产槲寄生植物凝集素A链和B链的酵母-大肠杆菌穿梭载体，在大肠杆菌中筛选、扩增载体后，转入真核表达体系酵母中诱导表达，并分别从RNA和蛋白水平检测了目的基因的
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本研究构建了韩国产槲寄生植物凝集素A链和B链的酵母-大肠杆菌穿梭载体，在大肠杆菌中筛选、扩增载体后，转入真核表达体系酵母中诱导表达，并分别从RNA和蛋白水平检测了目的基因的表达情况。
通过RT-PCR和RNA斑点杂交实验，确定36h为最佳诱导表达时间；通过Westernblot，发现KMLA链的分子量与EMLA链相似，而B链的分子量与EMLB链不同；通过ELISA实验，确定目的蛋白的表达量分别达到1.24μg/mg和1.75μg/mg总蛋白，而且发现Kozak序列对于成功、高效地在真核表达体系中表达目的蛋白起非常关键的作用。综合以上结果，本实验为进一步大规模生产目的蛋白奠定了基础。
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