组蛋白变异体H2A.Z在小鼠成纤维细胞向神经元转分化中的作用研究

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体细胞直接转分化是将一种终末分化态的细胞转变为另一种特定类型细胞的过程,这为组织、器官的损伤修复以及神经退行性疾病的治疗等提供了新的途径。本课题主要研究组蛋白变异体H2A.Z在小鼠成纤维细胞向神经元转分化过程中的作用。研究发现,在小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)中,过表达组蛋白变异体H2A.Z,能够将MEFs直接转分化为神经元。免疫荧光染色发现,H2A.Z诱导的神经元(iNs)不仅能够表达神经元标志物Tuj1,而且在iNs逐步成熟后,也能够表达成熟神经元的标志物:Map2,Synapsin以及NeuN。而大部分iNs都能够表达抑制性神经递质(GABA和GAD67),其中有少数细胞则表达兴奋性神经递质(vGlut1)。膜片钳检测发现,成熟的iNs能够产生Na+/K+电流,动作电位(AP)以及自发动作电位。而加入特异性的Na通道抑制剂河豚毒素(TTX)后,Na+电流,动作电位以及自发动作电位都受到了明显抑制。综上所述,说明iNs不仅表达神经元相关的特异性蛋白,还具备类似于经典神经元特有的电生理特性。  随后,我们将相同的策略应用到出生后的小鼠成纤维细胞(MPFs)上,发现H2A.Z同样能够将MPFs直接转分化为神经元。而且这类诱导性神经元也同样表达神经元特异性标志物:Tuj1,Map2,Synapsin以及NeuN。电生理检测发现,这些细胞也能够产生Na+/K+电流,动作电位以及自发动作电位。  综上,组蛋白变异体H2A.Z能够促进小鼠成纤维细胞向神经元的转分化,而这也为深入研究组蛋白变异体在转分化以及神经发育过程中的作用机制提供了新的思路。
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