【摘 要】
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目的:肿瘤是一类细胞周期病。细胞周期调控失常、细胞增殖失控被认为是恶性肿瘤发生的重要机制;前期研究认为,NLK与多种肿瘤的增殖与凋亡密切相关。本研究拟证实在非小细胞肺癌
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目的:肿瘤是一类细胞周期病。细胞周期调控失常、细胞增殖失控被认为是恶性肿瘤发生的重要机制;前期研究认为,NLK与多种肿瘤的增殖与凋亡密切相关。本研究拟证实在非小细胞肺癌中阻断内源性NLK的表达对NSCLC细胞生物学行为的影响,为进一步研究NSCLC发病分子机理提供科学依据。方法:Westemblotting验证NLK在NSCLC细胞系:A549、H1299、NCI-H1581、NCI-H522及SK-MES-1中的表达情况;利用慢病毒载体系统构建NLK-shRNA干扰载体,感染H1299肺腺癌细胞系,获得NLK干扰细胞系,并以此为研究对象,利用real-time PCR验证慢病毒感染后NLK的表达水平;细胞增殖实验、克隆形成实验、流式细胞周期检测及凋亡实验研究NLK与NSCLC细胞增殖、凋亡的生物学行为的关系。结果:Westemblotting结果显示:NLK在A549、H1299、NCI-1581、NCI-H522及SK-MES-1五株非小细胞肺癌细胞系中均有表达;NLK-shRNA慢病毒干扰载体感染NSCLC H1299细胞系后,real-time PCR检测结果显示内源性NLK表达被抑制;●阻断内源性NLK表达后,细胞增殖实验结果提示细胞增殖能力减弱;克隆形成实验结果显示细胞克隆形成减少;流式细胞周期结果发现细胞周期发生G1期阻滞;凋亡实验证实凋亡细胞比例显著增加。结论:NLK异常表达可能通过影响细胞的增殖与凋亡参与NSCLC的恶性演进。
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