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作为一种天然催化剂,酶在催化过程中具有的催化效率高,反应条件温和,高度专一的特点,同时也有易失活和难回收等阻碍酶工业应用的特点。为了利用酶优良催化性能的同时克服上述弱点,固定化酶成为专家学者们的研究重点。而固定化酶的性能主要取决于固定化方法和所使用的载体材料。 本论文中,我们将制备三种不同的复合材料作为载体,以共价结合的方式,分别固定化纤维素酶或辣根过氧化物酶,具体内容如下: (1)设计合成了磁性复合微球Fe3O4@SiO2@P(GMA-co-NIPAM),并对其性能和形貌进行表征。该微球呈现直径约为350nm的核-壳-壳结构,同时具有超顺磁性。将其应用到纤维素酶的固定化过程中,最佳固定化条件下得到纤维素酶固载量约为233.00mg g-1.对固定化酶的酶学性能进行了测定,相对于游离酶,固定化酶的催化温度域拓宽;催化 PH值没有太大影响;温度稳定性,贮藏稳定性均有提升。利用固定化酶反复水解催化羧甲基纤维素6次后,相对酶活为65.6%,具有较高的重复操作性。此外,固定化纤维素酶具有一定的热变性复性能力。 0设计合成磁性多臂复合微球Fe3O4@PAA-6-arm-PEG-NH2,并对性能和形貌进行表征。利用戊二醛连接辣根过氧化物酶和材料表面的氨基,得到共价固定化辣根过氧化物酶。其次,探讨了固定化过程〔戊二醛浓度,材料量,时间,温度)对固定化结果的影响,得到酶固载量约为139.82mg g-1,远远高于其他学者的研究。固定化辣根过氧化物酶的酶学性能都有了一定程度的提升。其中,在贮存60天后,固定化辣根过氧化物酶的相对酶活高达71.05%;催化反应8次后,相对酶活为61.06%。最后,探讨了该固定化辣根过氧化物酶降解水溶液中苯酚的能力,优化降解过程,如苯酚浓度、过氧化氢量、固定化酶用量、反应时间。在此基础上,对含有苯酚的水溶液进行降解,对比载体材料和游离辣根过氧化物酶,固定化酶的降解速率明显高于游离酶和载体材料。 (3)设计合成了磁性氧化石墨稀复合材料 GO-Fe3O4-6-arm-PEG-NH2,并对其形貌结构进行表征。该材料呈现近乎透明的薄膜状,具有超顺磁性,饱和磁化强度为30.80 emu g-1。利用 GO-Fe3O4-6-arm-PEG-NH2固定化辣根过氧化物酶,最佳酶固载量约为186.34 mg g-1.相比游离酶,固定化辣根过氧化物酶对催化环境的条件耐受性略有增强。温度稳定性,贮存稳定性和操作稳定性有所提升。利用固定化辣根过氧化物酶进行苯酚降解实验,由于氧化石墨烯材料具有一定类酶催化性能,固定化辣根过氧化物酶对苯酚的降解效果远远高于游离酶和载体材料。