食用菌蛋白与酶解多肽的制备及抗氧化活性的研究

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食用菌风味良好且蛋白丰富,但目前国内外对食用菌功能活性成分的研究主要集中在多糖一类,针对蛋白方面的研究较少。若能进一步开展食用菌蛋白活性相关方面的研究可有效加强食用菌蛋白资源的开发、提高其综合利用率。本研究以秀珍菇、黄色金针菇、杏鲍菇、榆黄蘑、桃红平菇、平菇和虫草花七种食用菌为原料,测定了其主要营养成分。采用碱提酸沉法和酶解法分别获得食用菌蛋白和酶解多肽。利用DPPH自由基清除法、还原力法和ORAC法三种体外抗氧化活性评价方法,初步评估七种食用菌蛋白和酶解多肽的抗氧化能力;对抗氧化活性最强的酶解多肽进行大孔树脂分离纯化,并研究大孔树脂对其吸附动力学和热力学;研究了不同分离组分对氧化损伤PC12细胞的保护作用。具体结果如下:⑴从测定主要营养成分含量的结果可知,七种食用菌的蛋白质含量为14.87%31.52%,脂肪含量为0.86%6.88%,灰分含量为3.54%6.38%,水分含量为5.05%9.94%,总糖含量为27.57%52.06%。其中,虫草花的脂肪和蛋白质含量最高,灰分含量最高的是秀珍菇,水分含量最高的是榆黄蘑,总糖含量最高的是杏鲍菇。⑵通过三种体外抗氧化活性测定方法评价七种食用菌的抗氧化活性。结果表明,在浓度为1 mg/mL时,DPPH自由基清除能力最强的是虫草花,虫草花蛋白和酶解多肽的清除率分别为93.77%和90.83%,低于同浓度下的GSH(96.12%);相同浓度条件下,还原力最强的是黄色金针菇,黄色金针菇蛋白和酶解多肽的还原力分别达到0.67和0.66,略低于同浓度下的GSH(0.72);ORAC活性的测定中,黄色金针菇蛋白在七种食用菌蛋白中具有最高的ORAC值(2974.33μmol TE/g),秀珍菇酶解多肽(PGP)在七种食用菌酶解多肽中具有最高的ORAC值(7541.09μmol TE/g),均高于GSH的ORAC值(1613.60μmol TE/g)。⑶研究了SP-825L,XAD-16,HP-20和HP-2MGL四种大孔树脂对秀珍菇酶解多肽的吸附动力学和热力学。结果表明准一级动力学方程可以较好的拟合大孔树脂XAD-16,准二级动力学方程可以较好的拟合大孔树脂HP-20和HP-2MGL,颗粒内扩散方程可较好的拟合大孔树脂SP-825L和XAD-16;Freundlich模型适合描述树脂对秀珍菇酶解多肽的等温吸附行为,且树脂对秀珍菇酶解多肽的吸附是放热的物理吸附;最终筛选出XAD-16大孔树脂最适合秀珍菇酶解多肽分离富集,并研究了不同分离组分对H2O2诱导损伤的PC12细胞保护效果,结果显示组分PGP-IV(60%乙醇洗脱组分)具有最好的保护效果,与单纯H2O2损伤组的细胞存活率相比提高了18%左右。
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