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目的：(1)体外分离培养Balb/c小鼠脂肪间充质干细胞(ADMSCs),对其表面标记分子和多向分化潜能进行检测。(2)通过观察静脉移植同种异体ADMSCs对脓毒症小鼠生存率、体温、肝肾功能、炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-8)和抗炎症因子(IL-4、IL-10)的影响,探讨ADMSCs对LPS诱导的脓毒症小鼠的治疗作用及其机制。方法：(1)获取SPF级Balb/c小鼠腰背部、大网膜处的脂肪组织,采用胶原酶消化法和贴壁法分离获得Balb/c小鼠ADMSCs,并对其进行体外培养。选择第3代ADMSCs,采用流式细胞技术对其表面标记分子进行检测,通过化学诱导法定向诱导细胞成骨、成脂肪、成软骨分化,分别予以茜素红染色,油红O染色,Alcian blue染色进行鉴定。(2)Balb/c小鼠60只,体重22-28g(8-12周龄),随机分为空白对照组20只,脓毒症对照组(LPS组)20只,ADMSCs移植组(ADMSCs组)20只。经尾静脉注射LPS(剂量为15mg/kg,浓度1mg/mL)建立脓毒症模型,空白对照组注射生理盐水,15mL/kg。 ADMSCs组于模型建立5min后经尾静脉注射ADMSCs (106,100uL),空白对照组和LPS组均注射生理盐水100uL。每4小时观察并记录小鼠生存情况和体温,直至48h。(3) Balb/c小鼠30只,体重22-28g(8-12周龄)30只小鼠被随机分为3组,即空白对照组10只、LPS组10只和ADMSCs组10只,小鼠经尾静脉注射LPS(剂量为10mg/kg,浓度为1mg/mL)建立脓毒症模型,其余处理方法同上给药后6h经心脏采血检测肝肾功能指标SCi、ALT和AST水平,同时采用酶联免疫吸附法检测血清炎症因子和抗炎症因子TNF-α、IL-4、IL-6、IL-8及IL-10水平。结果：(1)成功分离培养出Balb/c小鼠ADMSCs,流式鉴定结果显示：CDllb、CD45表达呈阴性,CD34、CD44、CD106、CD29表达均呈阳性,Balb/c小鼠ADMSCs在特定诱导条件下,具有向骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞分化的潜能。(2)生存率：正常对照组48h内小鼠生存率为100%。LPS组和ADMSCs组小鼠随时间延长,生存率逐渐下降。ADMSCs组24h生存率为65%,较同时间点LPS组(30%)高,差异有统计学意义(P<0.001)。生存分析结果显示ADMSCs组小鼠总体生存率较LPS组高,差异有统计学意义(P<0.001)。(3)体温：正常对照组小鼠体温在正常范围内波动,LPS组和ADMSCs组小鼠体温分别在0-8h、0-12h内有下降,而后逐渐回升并保持在正常范围内。LPS组小鼠平均体温在4h、8h、12h、16h均低于36℃,低于同时间段正常对照组,差异有统计学意义(P<0.001), ADMSCs组小鼠平均体温在4h、8h、16h均较同时间段LPS组高,差异有统计学意义(P<0.001)。(4)肝肾功能：建模后6h, LPS组小鼠血清SCr、ALT及AST水平较正常对照组高,差异有统计学意义(P<0.05); ADMSCs组小鼠血清ALT和AST水平较LPS组低,差异有统计学意义(P<0.05)。(5)炎症因子和抗炎症因子水平：建模后6h, LPS组小鼠所有血清炎症因子水平较正常对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05); ADMSCs组小鼠血清TNF-α、 IL-4、IL-6、IL-8及IL-10水平均低于LPS组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：(1)本研究所获得细胞具有贴壁生长、干细胞表型及多向分化能力,符合ADMSCs特征。(2)脓毒症可引起小鼠低体温,血清SCr、ALT、AST、TNF-α、IL-4、IL-6、IL-8和IL-10水平升高。(3)静脉移植同种异体ADMSCs可以降低脓毒症小鼠血清TNF-α、 IL-4、IL-6、IL-8和IL-10水平,发挥双重炎症调节作用,保护器官功能、改善低体温、提高生存率。图6幅,参考文献114篇