【摘 要】
：
目的:本研究旨在探索神经调节蛋白-1（Neuregulin-1,NRG-1）对过氧化氢诱导的小鼠骨髓间充质干细胞（Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）衰老的影响。方法:用H2O2诱导构建小鼠骨髓间充质干细胞的衰老模型,将BMSCs分为3个组:对照组、H2O2组、H2O2+NRG-1组。使用CCK8试剂盒检测不同浓度H2O2干预后BSMCs的存活率,设置
论文部分内容阅读
目的:本研究旨在探索神经调节蛋白-1（Neuregulin-1,NRG-1）对过氧化氢诱导的小鼠骨髓间充质干细胞（Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）衰老的影响。方法:用H2O2诱导构建小鼠骨髓间充质干细胞的衰老模型,将BMSCs分为3个组:对照组、H2O2组、H2O2+NRG-1组。使用CCK8试剂盒检测不同浓度H2O2干预后BSMCs的存活率,设置了H2O2的浓度梯度:0、15、30、60、90、180、360、480μmol/L,进行细胞存活率的检测,选出适宜的细胞衰老诱导浓度。对照组不予特殊处理,H2O2+NRG-1组在衰老诱导前加入50ng/ml的NRG-1进行预处理1h。然后,H2O2组、H2O2+NRG-1组用含浓度为250μmol/L H2O2的完全培养基处理2 h后换液,再更换完全培养基继续培养24h,进行相关指标检测。用流式细胞仪检测各组细胞凋亡的情况,用β-半乳糖苷酶（Senescence-associated-β-galactosidase,SA-β-gal）染色法检测细胞衰老情况,流式细胞术分别检测对照组、H2O2组、H2O2+NRG-1组BMSCs的细胞周期,即G0/G1期、S期、G2/M期这三个阶段所占的比例,定量聚合酶链式反应（Quantitative polymerase chain reaction,q PCR）法检测NRG-1的基因表达情况,检测衰老相关基因P53、P21 m RNA的表达,Western blot检测Erb B2（Phospho-Tyr877）的表达情况,以及衰老相关蛋白乙酰化的P53以及P21的表达变化。划痕实验、Transwell实验检测细胞的迁移情况。结果:根据CCK8检测结果,计算的BMSCs的细胞存活率,选择浓度为250μmol/L的H2O2作为外源性氧化剂诱导BMSCs衰老。凋亡结果显示:与对照组相比,H2O2组的凋亡无差异（P＞0.05）;与H2O2组,H2O2+NRG-1组的凋亡呈轻微下降（P＜0.05）,说明此浓度的H2O2不会明显造成BMSCs凋亡,可以用于诱导衰老。β-半乳糖苷酶染色实验显示:与对照组比较,H2O2组SA-β-gal的阳性细胞百分比升高（p＜0.01）;与H2O2组比较,H2O2+NRG-1组的SA-β-gal阳性细胞百分比下降（p＜0.01）。流式细胞仪检测细胞周期实验结果:与对照组比较,H2O2组的细胞周期处于G0/G1期的细胞比例升高,S期所占比例减小,G2/M期所占比例减小,提示BMSCs的增殖明显受到抑制（P＜0.05）;与H2O2组相比,H2O2+NRG-1组的G0/G1期所占比例减少,S期所占比例增加,G2/M期所占比例增加,提示H2O2+NRG-1组的增殖抑制明显改善（P＜0.05）。q RT-PCR实验结果表明:与对照组比较,H2O2组BMSCs的NRG-1 m RNA的表达下降（P＜0.05）,P53、P21 m RNA的表达升高（P＜0.05）;与H2O2组相比,H2O2+NRG-1组的NRG-1 m RNA的表达上调（P＜0.05）,P53、P21 m RNA的表达下调（P＜0.05）。Western blot实验结果显示:与对照组相比,H2O2组对Erb B2蛋白磷酸化的抑制无明显统计学差异（P＞0.05）;与H2O2组相比,H2O2+NRG-1组的p-Erb B2明显上调（P＜0.05）。与对照组相比,H2O2组的乙酰化的P53、P21蛋白表达水平显著增高（P＜0.05）;与H2O2组相比,H2O2+NRG-1组的乙酰化的P53、P21蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）。划痕实验结果表明:与对照组比较,H2O2组的细胞迁移能力明显下降（P＜0.01）;与H2O2组相比,H2O2+NRG-1组的细胞迁移能力明显上升（P＜0.05）。Transwell实验结果表明:H2O2组的细胞迁移能力明显下降（P＜0.05）;与H2O2组相比,H2O2+NRG-1组的细胞迁移能力明显上升（P＜0.05）。结论:（1）NRG-1具有改善过氧化氢诱导的小鼠骨髓间充质干细胞衰老的作用,保护BMSCs的增殖、迁移能力。（2）NRG-1改善BMSCs的衰老可能通过调控Erb B2的磷酸化,以及调控衰老相关基因P53/P21,调控衰老相关蛋白乙酰化的P53及P21来实现的。
其他文献
随着输电规模的不断扩大,保障输电线路的安全是电网运行的关键问题。绝缘子是电力杆塔上绝缘控件,除了要经受正常机械、电力的高负荷运转之外,还容易遭受外界自然因素的影响,容易发生自爆,多次引发电力安全事故,因此绝缘子缺陷及故障检测是输电线路巡检的主要任务之一。传统的人工巡检方式劳动强度大、工作效率低下,还具有一定的危险性,天气因素会影响巡检工作。利用深度学习的目标检测算法对绝缘子自爆进行检测,可以更好提
随着我国大力发展5G技术,作为新基建的重点发展领域,5G基站建设数量呈指数型增长,高额电费支出已经成为通信运营商的负担,而电力体制改革和建设的进程不断加快,也促使基站运营商需要由传统的从电网单一购买模式,转向未来电力市场环境下的多元购电方式。作为新型电力系统负荷,5G基站如何降低购电费用支出,未来更好地适应电力市场交易环境等问题亟待解决。首先,梳理了电网向5G基站供电的方式、5G基站用电特点、5G
地枇杷营养丰富，含有黄酮类、三萜类、甾醇类、香豆素类、木脂素类、有机酸等生物活性成分，具有抗氧化、抑菌、消炎、抗病毒、抗肿瘤等多种生物学功能，是一种天然的饲料添加剂。本文对地枇杷的营养成分、有效活性成分、生物学功能、牧草修复及在禽畜生产中的应用进行论述，为地枇杷的进一步研究提供参考。
中国自2001年加入世贸组织后,面临经济多元化挑战,社会信用体系建立迫在眉睫,2015年国务院发布“电改9号文”及配套文件明确“电力市场信用体系建设”及相关具体措施等,2019年国务院办公厅发布文件明确建立以“信用为基础”的新型监管机制。在对中国电力市场信用相关文献以及中国电力市场信用体系建设现状进行梳理的基础上,首先,以电力市场交易信用监管为研究对象,按照时间顺序研究分析中国电力市场交易信用监管
干式变压器应用广泛,传统的计划检修不仅会造成资源浪费,而且会对其运行状态发展趋势造成负面影响。状态检修以设备运行状态为依据安排检修决策,能提高干式变压器运行可靠性和经济性,但目前对干式变压器状态检修的研究很少。而干式变压器异常运行状态的宏观表现往往是其异常温度、异常运行声音,本文在声纹监测法的基础上,研究了干式变压器的运行声音异常监测方法和运行状态评估方法。对干式变压器的运行状态进行了研究,分析了
在全球性能源危机和环境污染的双重背景下,我国大力发展可再生能源同时加快推进能源互联网建设。综合能源系统作为能源互联网的重要物理载体,是未来能源系统发展主要方向,综合能源系统运行优化是提高能源利用效率的关键。此外,随着售电市场的开放和智能家居设备的普及,居民需求响应条件已经成熟,在综合能源系统中开展综合需求响应具有十分重要的意义。但是,综合能源系统涉及设备众多、约束条件复杂、各方利益诉求矛盾导致综合
能源转型是我国实现“双碳”目标的重要任务,光伏具有获取来源广、排放污染少等优点,大规模光伏并网将是加速能源转型的关键举措。与传统同步机不同,光伏通过锁相环控制实现与交流电网同步运行,随着光伏发电占比的日益提高,含故障穿越控制与虚拟惯性控制的光伏系统复杂响应特性将使传统电网暂态行为发生根本转变,电力系统的同步过程将由物理主导同步逐渐演变为控制主导同步。传统同步机功角稳定分析方法难以计及光伏系统复杂的
近年来,海洋冲突日益加剧,美日等军舰在我国领海活动频繁,严重威胁我国海洋权益与岛礁安全。在战略岛礁防护任务中,协同合围是一种常用战术,能有效驱逐危险目标。利用无人艇集群对目标进行协同合围,具有成本低,精度高和灵活性大的优点,能有效提升岛礁防卫的效率与范围。然而,在实际应用中,目标通常具有变速、多目标等复杂特性,容易导致合围失败的问题。此外,由于传感器成本与使用环境的限制,无人艇可能只能获取方位约束
目的:探讨艾滋病相关淋巴瘤（acquired immunodeficiency syndrome related lymphoma,ARL）患者的临床特点及预后情况。方法:回顾性分析广西壮族自治区龙潭医院感染中心2014年1月至2019年12月收治的40例ARL住院患者的临床资料,采用Kaplan-Meier法进行生存分析,生存曲线间的比较采用Log-rank检验,预后影响因素采用单因素Logis
国内生产总值是反映一个国家经济发展水平和状况的重要指标,对其进行预测有着至关重要的意义。单纯地依靠时间序列进行线性分析,难以适应当前形势下复杂多变的社会经济背景。因此本文综合考虑影响国内生产总值的相关因素,选取全社会用电量、电力生产量、能源消费总量、一次性电力及其它能源消费量四个指标,辅助往年GDP（Gross Domestic Product）数据,构成预测网络,提高预测的精度。本文共分为五部分