孔雀石绿是一种三苯甲烷类染料,具有致畸、致癌、致突变的高毒性,在我国属于禁止检出药品,因其对水霉病具有显著抑制效果仍被一些养殖者非法应用于水产养殖中,显性的孔雀石绿进入鱼体后经过代谢会转化为对人体更加有害的隐性孔雀石绿。组胺的残留是水产食品存在的重要安全问题之一,当人体摄入过量组胺时会引起过敏反应,严重者甚至会危及生命。针对孔雀石绿与组胺的检测以高效液相色谱法、液质联用方法为代表的仪器分析方法为主,上述方法虽然具有精度较高、灵敏度较高等优势,但由于其前处理较为繁琐、依赖于大型仪器及成本较高等问题不利于食品安全快速检测,因此本文在薄层层析色谱法的基础上结合纳米直读显色材料,开发出了水产品中孔雀石绿及组胺超标问题的快速检测直读显色半定量方法。具体研究内容如下:(1)为了建立TLC直读显色检测水产品的组胺含量方法,本研究基于溶胶-凝胶法成功构筑了茚三酮@二氧化钛纳米复合显色材料,将其构建在TLC板上组胺所对应的比移值(Rf)处形成一个组胺捕获显色区。选取正丁醇:丙酮:氨水展开体系对水产品提取液进行快速薄层直读显色检测,并应用Image J软件对显色后的条带色斑进行分析。结果表明,在优化后的展开条件下可以有效分离组胺与水产品中可能含有的其他氨基酸及生物胺,Image J软件分析的结果证明显色条带颜色深浅度与组胺浓度之间存在良好的线性关系(R2=0.98),即可用肉眼直读判别分析。本法实现了水产品中的组胺含量的检测,线性范围为37.5-1200mg·kg-1,肉眼最低识别检出限可达18.75 mg·kg-1。此外,液相分析方法的验证结果证明了本研究检测结果在可行性范围。本研究所开发的方法在水产品快速检测组胺领域具有广泛的应用前景,也为进一步实现水产品中其他生物胺类的显色分析提供了理论参考。(2)为了建立一种基于薄层色谱图像分析法的孔雀石绿直读显色检测与半定量方法,基于溶胶-凝胶法制备了碘酸钾@二氧化钛纳米复合显色材料,将其打印在TLC条带上隐性孔雀石绿的比移值(Rf)处形成自显色区,辅以碘化钾酸性水溶液作为显色支持液,并结合Iamge J软件对显色后的条带进行分析。针对实际样品检测时,先用还原剂将孔雀石绿全量还原成无色的隐性孔雀石绿,再进行直读显色分析。结果表明,显色条带色度与孔雀石绿浓度之间存在明确的线性关系(R2=0.99),即可用肉眼直接判读分析,实现了养殖水体与水产品中孔雀石绿总量的直读显色半定量检测。针对养殖水体检测线性范围为2.5-160μg·L-1,肉眼识别检出限为1.6μg·L-1。针对水产品检测线性范围为5-320μg·kg-1,肉眼最低识别检出限为3.2μg·kg-1。同时,液相-质谱方法验证了显色分析结果具有可靠性。该研究为孔雀石绿快速检测领域提供了新的参考,及为研究其他三苯甲烷类染料的直读显色分析提供了理论依据。