超声介导紫杉醇微泡治疗卵巢癌的实验研究

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xusir99
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第一部分超声破坏紫杉醇微泡辐照参数优化和紫杉醇对卵巢癌细胞的体外治疗浓度选择目的:探索超声破坏紫杉醇微泡辐照适宜的参数和紫杉醇对卵巢癌细胞SKOV3的体外治疗适宜的浓度。方法:采用MTT比色法检测不同剂量紫杉醇对SKOV3细胞的细胞抑制增殖率和超声破坏紫杉醇微泡对SKOV3细胞的急性毒作用,并以此确定适宜的超声辐照参数以及紫杉醇剂量。结果:单纯超声和一定浓度的的紫杉醇对SKOV3细胞均有明显的细胞毒作用。当声强为0.25W/cm2,辐照时间30S即可破坏微泡。当声强固定在0.5W/cm2,时间10S,20S,30S,破坏紫杉醇微泡后即检测细胞的存活率为92.01%,84.91%,80.17%。当紫杉醇浓度为10-8,10-7,10-6,10-5mol/L时,细胞在72h的增殖抑制率为30.05%,37.69%,56.46%,66.59%。当紫杉醇浓度为10-8mol/L时,24h,48h,72h的抑制率为9.82%,23.12%,30.05%。随药物作用的时间表现出明显的抑制效应,而且浓度越大抑制效应越明显,有明显的剂量效应时间关系。结论:紫杉醇对卵巢癌SKOV3细胞增殖有抑制作用。超声破坏载紫杉醇微泡对卵巢癌SKOV3细胞的急性毒作用影响不大。适宜的超声辐照参数为0.5W/cm2X30S,紫杉醇剂量为10-6mol/L。第二部分超声破坏紫杉醇微泡对卵巢癌细胞SKOV3增殖和凋亡的影响及细胞间隙连接通讯功能的研究目的:从细胞增殖和凋亡及细胞间隙连接通讯功能,观察超声破坏紫杉醇微泡对SKOV3细胞的抑制增殖和诱导凋亡作用和细胞间隙连接通讯功能的上调影响。方法:通过MTT比色法检测超声破坏紫杉醇微泡后卵巢癌SKOV3细胞的增殖能力,采用FCM法,透射电镜检测超声破坏紫杉醇微泡对卵巢癌SKOV3细胞作用后细胞超微结构的改变。用激光共聚焦检测超声破坏紫杉醇微泡对卵巢癌SKOV3细胞的细胞间隙连接功能的变化情况。结果:超声破坏紫杉醇微泡和紫杉醇及超声联合紫杉醇均能明显抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖,但是超声破坏紫杉醇微泡的作用更明显,这三组之间比较,差异具有显著意义(P〈0.010),而相同浓度的单纯紫杉醇微泡对SKOV3细胞的增殖影响不显著;透射电镜观察到超声联合紫杉醇微泡组可见凋亡小体,超声联合紫杉醇可见凋亡细胞,紫杉醇组观察到早期凋亡细胞,空白组和单纯微泡组细胞形态较为正常。FCM定量分析结果表明各组细胞的凋亡率为:空白组(1.54±0.15)%,单纯紫杉醇微泡组(6.26±0.26)%,单纯紫杉醇组(11.06±2.87)%,超声联合紫杉醇组(16.95±0.70)%,超声联合紫杉醇微泡组(26.87±0.56)%。超声破坏紫杉醇微泡后,SKOV3细胞CJIC功能上调显著高于其它各组,差异均有显著性。结论:超声破坏紫杉醇微泡不仅能抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖,还有诱导其凋亡的作用,并能使其细胞间隙连接通讯功能上调。
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