【摘 要】
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目的:本研究试图探讨中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)在小鼠溃疡性结肠炎模型中的表达情况,并且通过检测紧密连接蛋白(claudin-1)的表达,阐述NETs与肠道屏障功能损伤程度的相关性。研究方法:本研究采用清洁级生后6-8周的雄性Balb/c小鼠60只,按完全随机方法分为正常对照组和模型组。通过葡聚糖硫酸钠(dextran sulfat
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目的:本研究试图探讨中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)在小鼠溃疡性结肠炎模型中的表达情况,并且通过检测紧密连接蛋白(claudin-1)的表达,阐述NETs与肠道屏障功能损伤程度的相关性。研究方法:本研究采用清洁级生后6-8周的雄性Balb/c小鼠60只,按完全随机方法分为正常对照组和模型组。通过葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)建立溃疡性结肠炎急性期小鼠模型,并分别于造模后的1d、3d、5d留取小鼠结肠组织及血液样本。通过观察各组小鼠的临床表现,进行疾病活动指数评分及常规HE病理分析,反映肠组织损伤情况,以证明急性结肠炎的形成。采用PicoGreen?染料定量检测小鼠血浆中游离DNA的含量,免疫组织化学方法观察肠组织中NETs主要组成成分髓过氧化物酶(MPO)和瓜氨酸化组蛋白(CitH3)的表达及定位情况,Western blot方法检测紧密连接蛋白(claudin-1)的表达水平,明确NETs与肠道屏障功能损伤程度的相关性。结果:与正常对照组相比,DSS诱导建立的溃疡性结肠炎急性期小鼠模型在造模后均出现明显的体重下降,HE病理学染色均可见明显的结肠炎改变,并且随着时间的变化体重逐渐回升,各模型组的炎症活动指数DAI值与其正常对照组相比均显著上升(P均<0.05)。各模型组小鼠的血浆中游离DNA含量与其正常对照组相比均显著升高(P均<0.05),且随病情逐渐恢复,含量逐渐降低。免疫组织化学检测可见各模型组NETs形成增加,且随病情逐渐恢复,其含量呈逐渐下降的趋势。Western blot检测发现各模型组紧密连接蛋白claudin-1表达均下降(P均<0.05),且随病情逐渐恢复,其含量呈逐渐上升的趋势。结论:在溃疡性结肠炎急性期小鼠模型中NETs形成增加,且NETs的形成增加与肠屏障功能损伤相关。
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