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目的:泛素蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)是除自噬以外的另一种存在于真核生物的重要的蛋白降解方式,它可以通过降解泛素蛋白来维持细胞的稳定。去泛素羧基末端水解酶(UCH,ubiquitin carboxyterminal hydrolases)是UPS家族中的一员,近些年来有研究证实,UCH与某些肿瘤的发生发展有密切关系。课题组前期研究发现UCH-L3在急性髓细胞白血病细胞HL-60自噬性死亡中表达上调,并且在急性髓细胞白血病患者外周血中表达明显下调,为了更全面的探讨UCH与AML的关系,我们进一步研究了UCH-L1与UCH-L5与白血病细胞自噬性死亡之间的关系,以及UCH-L1与UCH-L5在白血病发生发展及治疗中的作用,从而深入探讨泛素蛋白酶体系统与自噬在白血病的发生发展中的作用,为白血病的治疗监测指明一个新方向。方法:1.自噬诱导剂雷帕霉素和自噬抑制剂3-MA分别处理HL-60细胞后,RT-PCR检测UCH-L1、UCH-L5、LC3Ⅱ三者mRNA的表达变化。2.Western-blot检测雷帕霉素和3-MA处理后UCH-L1、UCH-L5、LC3Ⅱ蛋白的表达水平。3.急性白血病化疗药物阿糖胞苷处理HL-60细胞后,RT-PCR检测UCH-L1、UCH-L5、LC3Ⅱ三者mRNA的表达变化。4.提取急性髓白血病患者外周血单个核细胞,RT-PCR检测初发组和缓解组UCH-L1、UCH-L5 mRNA的表达变化。结果:1.雷帕霉素处理HL-60细胞后,RT-PCR检测LC3Ⅱ在基因水平表达上调,UCH-L1和UCH-L5表达下调;3-MA处理HL-60细胞后,UCH-L1和UCH-L5表达上调,LC3Ⅱ下调。差异有统计学意义(p<0.05)。2.雷帕霉素处理HL-60细胞后,LC3Ⅱ在蛋白水平表达上调,UCH-L1和UCH-L5蛋白表达下调,3-MA处理HL-60细胞后,UCH-L1和UCH-L5蛋白表达上调,LC3Ⅱ表达下调。差异有统计学意义(p<0.05)。3.阿糖胞苷处理HL-60细胞后UCH-L1和LC3Ⅱ表达上调,UCH-L5表达下调。差异有统计学意义(p<0.05)。4.外周血基因水平检测显示,急性髓白血病初发组UCH-L1的表达和对照组相比下调,差异有统计学意义(p<0.05),缓解组和对照组、缓解组和初发组相比UCH-L1的表达上调,差异有统计学意义(p<0.05)。初发组UCH-L5的表达和对照组相比表达下调,差异有统计学意义(p<0.01);缓解组UCH-L5的表达和对照组相比表达下调,差异有统计学意义(p<0.05);缓解组UCH-L5的表达和初发组相比表达上调,差异有统计学意义(p<0.05)。结论:1.诱导急性髓白血病细胞HL-60自噬后,UCH-L1和UCH-L5在基因与蛋白水平均发生表达变化,说明二者可能参与雷帕霉素诱导的急性髓白血病细胞的自噬发生过程。2.阿糖胞苷处理HL-60细胞后LC3Ⅱ的表达上调,说明自噬参与了阿糖胞苷诱导急性髓细胞白血病细胞死亡的过程;UCH-L1与UCH-L5表达变化,说明两者均可能参与阿糖胞苷诱导急性髓细胞白血病细胞的死亡过程。3.UCH-L1和UCH-L5在急性髓细胞白血病初发组与缓解组中的表达均存在统计学差异,说明二者可能参与急性髓白血病的发生发展过程。