绿茶多酚抗衰老作用的实验研究

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目的:本课题拟从两方面对绿茶多酚改善学习记忆障碍和抗衰老作用加以研究,一是观察绿茶多酚对D-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆能力、脏器系数、体内自由基代谢和海马组织形态学变化的影响,二是观察绿茶多酚对东莨菪碱所致小鼠学习记忆障碍的影响,探讨绿茶多酚抗衰老作用及机制,为绿茶多酚的进一步研究开发提供理论基础和实验依据。方法:本实验分别采用D-半乳糖制备小鼠亚急性衰老模型,东莨菪碱制备小鼠记忆获得障碍模型。经过绿茶多酚100、250和625mg/kg灌胃给药不同时间后,采用行为学实验(跳台法、水迷宫法)检测绿茶多酚对小鼠学习记忆能力的影响。同时测定D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠脑、脾脏、胸腺和(睾丸+附睾)的脏器系数以及血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,脑组织匀浆SOD、MDA、B型单胺氧化酶(MAO-B)和一氧化氮合酶(NOS)水平。小鼠海马组织切片苏木素-伊红染色,观察海马神经元细胞形态学变化。结果:1.绿茶多酚对D-半乳糖所致衰老小鼠的影响D-半乳糖诱导小鼠出现记忆力下降,脑、胸腺、脾脏萎缩,血清和脑组织SOD活力下降,MDA含量增高,脑组织MAO-B活性升高,NOS活性降低,提示衰老小鼠模型造模成功。小鼠跳台实验中,绿茶多酚低、中、高剂量组(100、250、625mg/kg)都能减少错误反应次数(P <0.05),明显延长首次出现错误的潜伏期(P <0.01);小鼠水迷宫实验中,绿茶多酚低、中、高剂量组(100、250、625mg/kg)都能减少错误反应次数(P <0.05),明显缩短小鼠到达终点的时间(P <0.01)。绿茶多酚中、高剂量组(250、625mg/kg)可增加小鼠脑、脾脏、胸腺和(睾丸+附睾)系数(P <0.05或P <0.01);绿茶多酚低、中、高剂量组(100、250、625mg/kg)均可明显升高衰老小鼠血清和脑组织中总SOD活力和降低MDA含量(P <0.01),可明显减少脑中MAO-B含量(P <0.01),可不同程度增强脑组织中NOS活性(P<0.05或P <0.01)。病理切片显示,正常对照组,绿茶多酚中、高剂量组(250、625mg/kg)及吡拉西坦组小鼠海马区结构清晰,细胞致密,细胞间隙较小,而模型组和绿茶多酚低剂量组小鼠海马区结构不清,细胞较为分散,细胞间隙明显增大。2.绿茶多酚对东莨菪碱致小鼠记忆获得障碍的影响东莨菪碱诱导小鼠出现学习记忆障碍,与正常对照组相比,模型组小鼠在跳台试验中的错误次数增多(P <0.05)潜伏期明显缩短(P <0.01);在水迷宫试验中,模型组小鼠进入盲端次数明显增多(P <0.01),到达终点的时间明显延长(P<0.01)。小鼠跳台实验中,绿茶多酚中、高剂量组(250、625mg/kg)能减少错误反应次数(P <0.05),明显延长首次出现错误的潜伏期(P <0.01);小鼠水迷宫实验中,绿茶多酚低、中、高剂量组(100、250、625mg/kg)都能减少错误反应次数(P <0.05),缩短小鼠到达终点的时间(P <0.05或P <0.01)。结论:对D-半乳糖所致的衰老模型小鼠,绿茶多酚可改善其学习记忆能力,增强机体抗氧化系统功能,增加脾脏和胸腺重量指数,增强免疫功能,抑制衰老小鼠海马细胞的坏死,有明显的延缓衰老作用;对东莨菪碱所致的小鼠记忆获得障碍,绿茶多酚具有一定的改善作用。
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