【摘 要】
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目的 通过脐血干细胞移植在体内诱导分化为肝细胞的实验研究,进一步为脐血干细胞向肝细胞的分化提供证据,证实脐血干细胞的可塑性,为将脐血干细胞移植应用于治疗终末期肝病的
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目的 通过脐血干细胞移植在体内诱导分化为肝细胞的实验研究,进一步为脐血干细胞向肝细胞的分化提供证据,证实脐血干细胞的可塑性,为将脐血干细胞移植应用于治疗终末期肝病的研究奠定基础。 方法 ① 使用采血袋法采集脐血标本,分别采用改良HES（羟乙基淀粉）沉降分离法和Ficoll分离法两种方法分离脐血干细胞,比较分离前后有核细胞（nuclear cell,NC）数、分离后CD34+细胞数、分离后有核细胞回收率及台盼蓝拒染率,了解分离后有核细胞的数量和质量,为脐血移植创造条件。 ② 选用BALB/C裸鼠,将其随机分成实验组和对照组,实验组再根据输注有核细胞数的不同分成A、B、C三组。采用Co60治疗仪γ-射线对实验组和对照组进行亚致死剂量350cGy照射,照射后3小时内在无菌条件下由裸鼠尾静脉输入分离的人新鲜脐血有核细胞。实验A、B、C三组分别输入NC1.0×107个/只、2.0×107个/只、3.0×107个/只,对照组经尾静脉注入等体积无菌生理盐水。移植后第1、2、3、4和8周分别检测实验组和对照组外周血白细胞,移植后第4、6和8周通过流式细胞仪检测外周血人源性CD34+和CD45+细胞水平,了解人鼠细胞嵌合情况。移植后一个月对实验组A、B和对照组裸鼠分别按0.4ml/kg注射用玉米油稀释到100μl的四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl4）,实验组C注射等体积生理盐水。通过CCl4造成肝脏损伤,诱导脐血干细胞归巢到
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