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【目的】1.拟通过对照研究深低温冷冻法保存的新西兰白兔皮质骨与新鲜兔皮质骨的生物力学强度、病理学变化,探讨深低温冷冻法保存的同种异体骨生物力学强度的变化,为同种异体骨的临床应用提供理论支持。2.临床应用库存深低温冷冻同种异体骨移植修复创伤、骨肿瘤切除所致的大段骨缺损,比较移植前后宿主细胞免疫的功能变化,观察异体骨的愈合情况,评估术后肢体功能的恢复效果。【方法】1.基础研究部分:将50只新西兰白兔随机分为新鲜标本组(对照组)10只、实验组分别设深低温冷冻4周、8周、12周、16周组,各组10只。取兔双侧股骨皮质骨,去除软组织和软骨,修整并保留股骨转子下至股骨髁上段,深低温冷冻4周、8周、12周、16周组,各20根。阶梯复温后,测定极限弯曲强度(n=10),极限压缩强度(n=10),取股骨断端行病理切片,HE染色观察。对照组兔股骨取出后即行生物力学测定和病理观察。2.临床应用部分:1)36例骨肿瘤及创伤患者,同种异体骨移植术前1周内及术后7天、14天、21天、28天,空腹抽取肝素抗凝外周血,采用SP法检测T细胞亚群。2)术后3个月、6个月及12个月X线片与核素99Tcm-MDP(亚甲基二磷酸)骨骼显像比较,评估骨愈合。3)根据Mankin功能评分标准评估异体骨移植术后肢体功能恢复情况。【结果】1.基础研究部分:不同时段深低温冷冻的兔皮质骨与新鲜兔皮质骨所测得的生物力学强度对比,极限弯曲强度(f=0.156,p=0.959),极限压缩强度(f=0.907,p=0.468),P值均大于0.05,生物力学改变无统计学意义。病理学观察,16周内各组兔皮质骨显微组织结构无明显改变。2.应用部分:1)36例同种异体骨移植术的患者,术后7天细胞免疫功能降低,低于术前水平(P<0.05)。14天后逐渐恢复,28天后可恢复至术前1周水平(P>0.05),没有出现明显的细胞免疫排斥反应。2)全部病例均获随访,术后随访6~29个月,平均19个月。结合术后X线片、核素99Tcm-MDP骨骼扫描和临床体征评估骨愈合时间4~13个月,平均5.6个月,其中异体骨愈合34例,不愈合2例,肿瘤复发4例,感染1例(经抗感染、换药治疗后治愈)。3)肢体功能按Mankin标准评定:优21例,良7例,中6例,差2例,优良率77.8%(28/36)。【结论】1.16周内深低温冷冻法保存的异体骨生物力学特性稳定;2.同种异体骨移植后,宿主细胞免疫功能无明显改变;3.经深低温冷冻法保存的同种异体骨可作为修复大段骨缺损的良好移植物;4.大段深低温冷冻同种异体骨及异体半关节是四肢骨肿瘤切除后大段骨缺损较为理想的修复材料。