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香菇(Lentinus edodes)是全球第二大人工栽培食用菌。香菇具有较高的营养价值和医疗保健价值,深受消费者喜爱。香菇多糖(Lentinan,简称LNT)是从香菇子实体和菌丝体中提取而得到的高分子葡聚糖,具有显著的抗肿瘤、抗病毒、调节免疫功能等活性。本研究采用热水浸提法对香菇多糖的提取工艺进行了优化,利用正交试验确定了提取的最佳参数:提取温度60℃、料液比(g/mL)1:10、提取时间1h,多糖得率16.3%;LNT经DEAE纤维素52柱层析得到一个盐洗峰,收集相同峰位流出液,浓缩后沉淀得纯化多糖LNT-1;LNT经硫酸化修饰后,选用不同截留分子量的超滤膜对其进行分级,得到6个不同分子量组分;LNT-1和硫酸化分级多糖经Sephadex G100凝胶柱检测均得到单一对称峰,表明纯度较高;提取、纯化及修饰的不同产物经傅里叶红外光谱仪扫描分析,均具有典型的糖类特征吸收峰,说明均为多糖类物质;紫外扫描光谱显示在260nm、280nm波长下无吸收峰,表明不含核酸和游离蛋白。在多糖的体外抗肿瘤活性试验中发现,在100~1600μg/mL浓度范围内,LNT-1和硫酸化分级多糖均具有抑制肿瘤细胞生长的作用;在100~400μg/mL范围内,硫酸化分级多糖的抑制作用不明显,最大抑制率56.32%;800~1600μg/mL浓度下,6个组分都表现出较明显的抑制作用,最大抑制率85.05%;LNT-1对肿瘤细胞的最大抑制率为83.98%,与3KD和3~5KD组分相当,但强于其他组分。结果表明,LNT-1和硫酸化分级多糖在该浓度范围内对肿瘤细胞的生长有一定的抑制作用,且随着浓度的增大抑制作用增强;在多糖抗氧化试验中发现,LNT、LNT-1和硫酸化分级多糖均有明显的抗氧化活性,总抗氧化能力和还原能力较强,但对羟自由基和超氧阴离子的抑制率较低,LNT、LNT-1的抗氧化活性强于硫酸化分级多糖,试验结果表明,LNT、LNT-1和硫酸化分级多糖的活性在一定浓度范围内呈量效关系。