【摘 要】
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阿魏酸酯酶是一类能够将阿魏酸从细胞壁多糖、阿魏酸甲酯、低聚糖阿魏酸酯中释放出来的酶,而阿魏酸则是很多种药物的重要组成成分；阿魏酸酯酶还是纤维素酶的限速酶,在生物质能
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阿魏酸酯酶是一类能够将阿魏酸从细胞壁多糖、阿魏酸甲酯、低聚糖阿魏酸酯中释放出来的酶,而阿魏酸则是很多种药物的重要组成成分；阿魏酸酯酶还是纤维素酶的限速酶,在生物质能源和药物中间体的制备方面有很大的应用前景。本研究旨在利用未培养微生物的阿魏酸酯酶基因,获得高活性的阿魏酸酯酶。利用NCBI基因库,确定拟克隆的阿魏酸酯酶基因,提取mRNA,建立cDNA文库,进行阿魏酸酯酶基因的克隆,构建pET28a(+)-FAE表达载体,转入BLp感受态细胞中,加入IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE电泳检测蛋白,测定其分子量为40KDa左右。利用对硝基苯酚阿魏酸酯作为底物,测定其比活力为2805mU/mg。最适温度为40℃,最适pH值为6.4,最适底物浓度为0.6mmol/L(?)。利用重组的阿魏酸酯酶进行水解玉米种皮的应用研究,建立了气相色谱检测阿魏酸的方法。
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