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目的:从木芙蓉叶中提取分离出具有体内外抗呼吸道合胞病毒活性的化学成分。方法:采用观察细胞病变(CPE)法和中性红染色法检测木芙蓉叶的体外灭活病毒作用,并以体外抗呼吸道合胞病毒治疗指数(TI)为指标,对木芙蓉叶的提取溶剂进行筛选,确定最佳提取溶剂;对提取溶剂进行正交试验,优选出最佳提取工艺;以治疗指数(TI)为指标,采用正交试验方法对醇沉精制工艺进行优选,得到最佳醇沉精制工艺;选用三种类型大孔树脂对醇沉物分离,以体外治疗指数(TI)为指标,筛选出分离效果较为显著的大孔树脂类型;采用理化显色反应、薄层色谱法等对分离部位进行鉴定,采用紫外分光光度法,对成分含量进行测定,并进行方法学考察;以小鼠鼻腔滴入呼吸道合胞病毒(RSV)感染小鼠肺组织为模型,经灌胃给药,以肺指数及存活天数为评价指标,观察木芙蓉叶分离物体内抗病毒作用。结果:通过各溶剂提取物的体外抗病毒实验表明:水溶液的体外抗呼吸道合胞病毒治疗指数最大,其治疗指数(TI)为11.63;采用正交试验法,以治疗指数(TI)为指标,对木芙蓉叶的水提工艺进行优化得出最佳提取工艺为:加8倍量水,浸泡2h,煎煮4h,其治疗指数达34.01。采用醇沉法对水提物进行初步分离,显示醇沉物比上清液的抗病毒作用强;通过正交试验对水提醇沉工艺进行筛选,最佳工艺为:向相对密度为2:1稠浸膏中,加入8倍量的80%乙醇溶液进行醇沉,其治疗指数(TI)最高,为62.57;通过使用三种类型的大孔吸附树脂对醇沉物进行分离后,表明使用D101型大孔吸附树脂,用25%乙醇,对醇沉淀进行洗脱后的部位体外抗病毒效果较好,治疗指数为101.98。对25%乙醇的洗脱部位进行显色反应,结果表明活性洗脱部位中存在黄酮类成分;使用紫外分光光度法测得总黄酮含量为0.845%,并进行了方法学考察,其精密度试验、稳定性试验、重复性试验、加样回收率试验RSD%值均小于2%。以小鼠鼻腔滴入呼吸道合胞病毒病毒(RSV)感染小鼠肺组织为模型,灌胃给药,与病毒阳性对照相比,小鼠死亡率降低,并从肺组织外观可以观察到肺组织的病变程度有了明显的减轻,肺指数降低较为显著。结论:本实验以体外抗呼吸道合胞病毒病毒治疗指数(TI)为评价指标,对木芙蓉叶提取溶剂、水提工艺、醇沉工艺以及对其进行分离纯化的大孔树脂型号进行优选,将木芙蓉叶中抗呼吸道合胞病毒活性部位逐步分离纯化;通过理化鉴别鉴定25%乙醇洗脱部位中存在黄酮类成分;通过小鼠体内的抗病毒实验发现25%乙醇洗脱部位可以抑制由RSV引起的小鼠上呼吸道感染,并且在一定剂量范围内,其活性随剂量的增大而增强。