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目的：建立大鼠慢传输型便秘的动物模型.从肠传输功能、神经病理方面,对丹参枳术饮治疗大鼠STC进行深入的研究.为将丹参枳术饮开发成促结肠动力药展示良好的发展前景.
方法：
1.运用泻药法(大黄粉)复制大鼠慢传输型便秘的动物模型,并采用活性炭悬液推进法观察肠道运输功能,以判定模型是否成功.结肠标本进行HE染色,观察肠道病理变化.
2.造模成功的大鼠40只均按照随机化原则分为模型对照组、丹参枳术饮低剂量组、丹参枳术饮中剂量组、丹参枳术饮高剂量组.丹参枳术饮高、中、低剂量组分别予以生药24g/kg、12g/kg、6g/kg灌胃给药,相当于临床用药剂量的18倍、9倍、4.5倍.模型对照组予生理盐水,以20ml/kg灌胃给药.每日一次,连续给药15天.给药完成后,并采用活性炭悬液推进法观察肠道运输功能.
3.健康成年SD大鼠30只,按照随机化原则分为正常组10只,模型组20 只(其中模型组10只,治疗组10只).造模方法同实验2.正常组、模型组予生理盐水,以20ml/kg灌胃给药.治疗组予丹参枳术饮,以生药24g/kg灌胃给药.每日一次,15天为1疗程.取大鼠大肠(盲肠至肛门上方2cm),石蜡包埋,制作常规HE杂色和免疫组化染色.
结果：
1.运用泻药法成功地复制了大鼠慢传输型便秘的动物模型,肠道传输功能测定:与对照组相比,两期试验中大黄组肠道传输均有明显减慢.HE染色示两对照组各有轻度的粘膜慢性炎症,但未发现粘膜下层及肌间神经丛病变.与对照组比较,见模型组结肠肌间神经丛神经元变性、体积减少,粘膜下肌层部分增厚,胶原纤维化.
2.与模型对照组相比,丹参枳术饮高、中剂量组炭沫推进率均有明显增高,差异显著,其中高剂量组的差异非常显著(P<0.01).丹参枳术饮低剂量组与模型对照组比较,统计学无明显差异(P>0.05),且丹参枳术饮高、中剂量组炭沫推进率较丹参枳术饮低剂量组高(P<0.01、P<0.05),其他组间比较无统计学意义.
3.常规HE染色结果表明:对照组未发现粘膜下层及肌间神经丛病变.模型组更秘大鼠结肠肌间神经细胞排列紊乱,聚集成堆,分布不均,呈不规则形,神经细胞空泡变性.炎症细胞浸润,淋巴滤泡增多等,表明长期运用泻药对结肠肌间砷经有明显影响.治疗组可见粘膜慢性炎症减轻,肌间神经丛结构有所恢复,神经节数目增多,排列整齐.
4.VIP免疫组化染色结果显示:模型组与正常组比较P<0.01,说明便秘模型大鼠结肠肌间VIP神经阳性细胞与正常组比较明显减少;而丹参枳术组与模型组组比较P<0.05,丹参枳术组可增加因便秘而减少的VIP神经阳性细胞数量.正常组和丹参枳术组间比较无统计学意义.
5.SP免疫组化染色结果显示:模型组与正常组比较P<0.01,说明便秘模型大鼠结肠肌间SP神经阳性细胞与正常组比较明显减少:而丹参枳术组与模型组组比较P<005,丹参枳术组可增加因便秘而减少的SP神经阳性细胞数量.正常组和丹参枳术组间比较无统计学意义.
结论：
1 丹参枳术饮可治疗大鼠的慢传输型便秘,经丹参枳术饮治疗后的慢传输型便秘大鼠的肠道传输功能得到改善.2.丹参枳术饮可以增加STC大鼠的肠道肌间冲经丛内VIP、SP含量.丹参枳术饮治疗对肠神经系统的病理改变有所影响,但因实验数量较少,治疗时间亦较短,尚需进一步研究.总之,实验结果可以说明,丹参枳术饮对慢传输型便秘大鼠有明显的治疗作用,而且对结肠神经系统功能和结构改变有所影响,进一步研究有重要意义.