拟南芥β-葡萄糖苷酶BG3与耐旱性研究

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植物激素ABA在植物应对干旱、盐碱和冷害等多种胁迫环境的应答过程中起着重要作用。同时,它也调控种子休眠、萌发过程以及植株再生等发育过程。ABA的这些生理作用是由植物细胞内的ABA水平变化所决定的,植物体内ABA水平取决于两个相反的过程:合成和代谢途径,它们分别提高和降低ABA水平。植物体主要通过羟基化代谢分解途径以及与糖等物质共价结合失活途径来降低ABA水平的。植物体内ABA含量的升高有三种途径,其中最主要的是ABA的从头合成途径。二是通过BG1介导的结合态的ABA-GE的水解作用来获得游离态的ABA。三是通过BG2对ABA-GE的水解得到游离态ABA,进而提高植物的抗逆性。但是否还有其他β-葡萄糖苷酶参与水解ABA-GE释放ABA还有待研究。本文鉴定并获得拟南芥中β-葡萄糖苷酶家族成员BG3的T-DNA插入纯合突变体bg3。研究发现bg3突变体在离体失水实验中失水率明显高于野生型,且红外热像仪观察的结果也显示bg3突变体的叶表温度低于野生型。气孔行为分析发现,正常情况下bg3突变体气孔开度与野生型相当,但是胁迫处理时野生型气孔明显关闭而bg3突变体气孔仍处于较大的开放状态。同时,土培干旱胁迫情况下,该突变体的萎焉死亡速度快于野生型。随后测定了正常和胁迫处理时突变体和野生型体内游离ABA的含量,结果发现,正常情况下,ABA含量并无差别,但是当脱水处理12小时后,发现bg3突变体体内游离ABA含量明显低于野生型。同时,BG3基因在拟南芥根、茎、叶、花等组织中都有表达,并受多种非生物胁迫诱导而上调。这些都暗示了BG3可能和之前的BG1,BG2一样具有水解ABA-GE的能力,释放游离ABA,并参与了拟南芥的抗旱性。通过荧光共聚焦观察BG3:GFP瞬时转化的拟南芥叶肉细胞原生质体,发现BG3定位于细胞质中。为了从蛋白水平上研究BG3的功能,我们筛选并鉴定获得了BG3::MYC转基因植株,为后续研究提供了材料。总之,本研究为β-葡萄糖苷酶家族成员在调节ABA水平,并参与植物应对非生物胁迫的作用研究提供了实验证据。
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