翻译控制肿瘤蛋白(Translationally Controlled Turnor Protein，TCTP)属于一种高度保守并且大量表达的真核蛋白家族。其表达受转录和翻译水平的调节。TCTP具有多种生物学功能，例如影响细胞生长，细胞周期，恶性转化，细胞的抗逆性，凋亡。另外，在细胞外起到细胞因子的作用，参与许多免疫反应。　　 本项课题根据日本七鳃鳗(Lampetra japonica)口腔腺cDNA文库中cDNA序列和部分EST预测功能基因片段，得到一条能够翻译TCTP模体的开放阅读框，根据序列特异性和酶切位点设计特异性引物，调取全长基因，进行基因克隆，并将其原核表达，亲和层析纯化后得到蛋白纯品。对此蛋白进行了生物信息学分析，并研究了它在七鳃鳗其他组织中的表达情况，最后细胞外活性实验表明它有促进组胺释放及促凋亡功能。　　 首先对日本七鳃鳗(Lampetra japonica)口腔腺cDNA文库中1323条有效EST序列进行分析，得到一条能够翻译TCTP模体的开放阅读框，设计引物，以日本七鳃鳗口腔腺总RNA为模板进行RT-PCR，得长为519bp的目的基因，克隆至pET23b表达载体上，再转化至克隆菌DH5a后进行阳性转化子的筛选，然后将带有组氨酸标签的重组蛋白在E.coli BL21中进行了可溶性表达，经组氨酸亲和层析柱纯化后，获取分子量为22.4kD，浓度约为1.5mg/mL的TCTP纯品，将其命名为rLj-TCTP(recombinant Lampetra japonica TCTP)。　　 采用生物信息学的方法和工具对rLj-TCTP相应的氨基酸序列的理化性质、结构特征、功能及系统演化关系等进行预测和分析，以期为该蛋白的进一步研究提供一定的理论依据。　　 我们运用了RT-PCR的方法检测不同组织(心脏，肾，肠，腮，肌肉，肝脏，红细胞，白细胞)的特异性表达情况。结果表明该基因在各组织中都是不可或缺的重要基因。TCTP表达的稳定性表明其可能在细胞的生命周期中行使极其重要的生物学功能。　　 采用大鼠腹腔肥大细胞评价rLj-TCTP的组胺释放因子的活性将以梯度浓度(0.2ml/ml，lug/ml，5ug/ml，10ug/ml，50ug/ml，100ug/ml)与大鼠腹腔肥大细胞孵育，用荧光测定法测定组胺含量。结果表明，rLj-TCTP能够刺激大鼠腹腔肥大细胞释放组胺，并且呈剂量依赖性。由此可以推测，组胺作为一种免疫介质，七鳃鳗可以通过rLj-TCTP蛋白使宿主产生免疫反应，组胺还能够引起血管扩张效应，增强局部血流；另一方面，组胺还能增强血管内皮细胞表面凝血酶调节素TM的表达，凝血酶与凝血酶调节素结合，可降低凝血酶的活性，同时活化蛋白C，活化的蛋白C能够水解凝血因子Va和VIIIa，并且阻碍凝血因子Xa与血小板结合，还能够促进纤维蛋白的溶解，这三条通路都会最终抑制凝血反应。这为解释日本七鳃鳗的吸血生活习性提供了一定的理论依据，同时，提示rLj-TCTP将在临床抗凝治疗方面具有潜在的应用价值。　　 采用人脐静脉内皮细胞系HUVEC，人宫颈癌细胞系Hela来评价rLj-TCTP蛋白对这两种细胞增殖及其凋亡的影响。本实验运用了CCK-8法，DNA ladder法，流式细胞仪分析，荧光显微镜分析。表明rLj-TCTP蛋白可以促进Hela细胞凋亡，而对HUVEC影响不大。