【摘 要】
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目的:世界范围内肺癌的发病率和死亡率排名第一,其中肺腺癌占大多数。肺腺癌目前治疗手段多样,但治疗效果欠佳,预后差,寻求新的生物治疗靶点来改善其预后是非常有意义的。据报道,假基因在癌症中发挥致癌或抑癌的作用。但假基因衍生的RNA在肺腺癌中的作用及其分子机制仍不清楚。本研究的目的是探究假基因对肺腺癌转移和侵袭的影响。方法:本论文通过肿瘤相关数据库生物信息学分析发现并研究了假基因CLIC1P1在肺腺癌中
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目的:世界范围内肺癌的发病率和死亡率排名第一,其中肺腺癌占大多数。肺腺癌目前治疗手段多样,但治疗效果欠佳,预后差,寻求新的生物治疗靶点来改善其预后是非常有意义的。据报道,假基因在癌症中发挥致癌或抑癌的作用。但假基因衍生的RNA在肺腺癌中的作用及其分子机制仍不清楚。本研究的目的是探究假基因对肺腺癌转移和侵袭的影响。方法:本论文通过肿瘤相关数据库生物信息学分析发现并研究了假基因CLIC1P1在肺腺癌中表达情况以及其与患者预后的关系。然后通过CCK8、侵袭迁移、双荧光素酶、Western Blot和RT-q PCR等研究方法,探究CLIC1P1对肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭等的影响及其调控的分子机制。结果:发现CLIC1P1是肺腺癌中异常上调的假基因之一,其表达水平与患者不良预后显著负相关。体外肺腺癌细胞系H1299和A549中CLIC1P1敲降后显著抑制细胞侵袭与迁移,但不影响细胞增殖凋亡,并且其亲本基因CLIC1的RNA水平轻微下降,蛋白水平明显下降。此外,通过共转染miR-3127-5p模拟物和CLIC1P1或CLIC1野生质粒或突变质粒,发现转染CLIC1P1或CLIC1野生质粒荧光素酶信号显著减弱,但转染CLIC1P1或CLIC1突变质粒的荧光素酶信号没明显变化。通过单独或共同抑制CLIC1P1和miR-3127-5p后,我们发现,抑制miR-3127-5p大部分恢复了敲低CLIC1P1对两个肺腺癌细胞侵袭和迁移的抑制作用。最后,通过生物信息学分析发现了CLIC1可能参与肺腺癌发生发展的生物学通路以及一些小分子抑制剂。这些小分子抑制剂有可能逆转CLIC1高表达所致的生物学效应。结论:假基因CLIC1P1在肺腺癌中高表达,其可作为miR-3127-5p的分子海绵上调其亲本基因CLIC1的表达,从而促进肺腺癌细胞的侵袭迁移。说明CLIC1P1-miR-3127-5p-CLIC1轴对肺腺癌的侵袭转移具有重要意义。CLIC1P1有可能成为治疗肺腺癌的一个新的治疗靶点。
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