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血管性抑郁症是晚发性血管障碍性抑郁症,属于抑郁症的一种特殊亚型,具有严重危害性,主要由慢性缺血性脑白质损害及慢性应激等原因引发,伴随社会人口老龄化的加快及心脑血管疾病发病率的增加,本病的发病率呈逐年上升趋势。抑郁症与心脑血管疾病之间具有高度共病性,在慢性缺血或慢性应激状态下会互相致病,明显增加了患者的致残率和死亡率,严重影响患者的治疗和预后,同时该病对目前临床常用抗抑郁剂呈现出药物敏感性低,患者耐受性差,服用后易出现毒副作用,对患者及其家庭、社会造成沉重的负担,严重威胁人类健康和社会发展。导师黄世敬研究员在继承和发展名老中医临床经验过程中,总结和阐述了“虚气留滞”的学术思想,将血管性抑郁症的中医病机概括为元气亏虚和气血郁滞两端,并提出血管性抑郁可能机制是慢性缺血及应激引起神经血管单元失稳态及重构障碍、影响5-HT等情感神经递质水平及功能表达所致,益气开郁是有效治疗途径的假说。通过临床实践,总结出益气开郁法的代表方剂——开心解郁方,用于进一步深入研究。目的：通过建立血管性抑郁症大鼠模型并使用开心解郁方进行中药干预,观察宏观方面如动物行为学、脑血流量等变化,以及微观组织结构的变化,检测相关脑组织内5-羟色胺受体、血管内皮生长因子及其受体的蛋白和基因表达情况,目的在于探讨血管性抑郁症的发病机制和开心解郁方的干预机制。方法：1动物分组：将70只SD大鼠分为：(1)假手术组,进行LBCCA术时不结扎颈总动脉；(2)手术组,LBCCA术中永久性结扎双侧颈总动脉,手术成功后7天开始单笼隔离饲养,再分层随机分为：①模型组,术后7天进行CUMS,常规饲养；②中药组,模型组的基础上,使用大、中、小三个不同剂量的开心解郁方进行干预；③西药组,在模型组的基础上,使用西药盐酸氟西汀干预。2药物干预方式：将开心解郁方水煎浓缩,按照成人12倍、6倍和3倍的等效剂量配备大、中、小三种剂量,按照成人6倍等效剂量配备西药盐酸氟西汀。假手术组和模型组使用同等体积的蒸馏水,给药方式均为灌胃给药,于CUMS进行一半时给药,持续21天。3观察指标观察行为学(糖水偏好实验及旷场实验)和测定脑血流量；电镜下观察大鼠海马CA3区神经元超微结构变化；使用ELISA法以及NR法检测血清中细胞因子；Western-Blot和RT-PCR技术测定大鼠大脑皮层及海马的5-HT1A、5-HT2A、VEGF及其受体Flk-1蛋白及基因表达水平的变化。结果：1糖水偏好实验：与假手术组比较,模型组及中药小剂量组大鼠糖水消耗百分率明显降低(P<0.01)；与模型组比较,中药中剂量组、中药大剂量组和西药组三个治疗组的大鼠糖水消耗百分率显著增加(P<0.01)。2旷场试验：与模型组比较,治疗组大鼠较造模结束后在旷场实验两个项目中均有上升趋势,中药大剂量、中剂量两组明显增加了大鼠的运动距离(P<0.01),中药小剂量和西药两组也对其有改善作用(P<0.05)。在站立次数中,中药大剂量组和中剂量组起到了改善作用(P<0.01,P<0.05)。3脑血流量：与假手术组相比,模型组大鼠的脑血流量呈现明显降低状态(P<0.01),中药中、大剂量组无明显差异；与模型组相比,中药中、大剂量组以及西药组(P<0.01)可显著增加慢性脑缺血模型大鼠大脑血流量,中药小剂量组也有一定改善作用。4电镜结果：假手术组大鼠海马CA3区神经元细胞核外形完整,为圆形或椭圆形,核膜清晰可见,胞浆内可见丰富的细胞器,染色质分布均匀。模型组神经元出现肿胀变性,核膜不清并伴有凹陷、皱缩,可见核固缩,粗面内质网肿胀,线粒体嵴消失,空泡出现。胞浆内游离核糖体明显减少。西药组仍可见核膜凹陷,细胞器数目增多,空泡很少,染色质分布较均匀。中药中、大剂量组核膜清晰光滑,染色质细小分散,均匀分布,聚集较少；线粒体、粗面内质网等均较模型组有所改善,数目增多,胞浆肿胀现象较少。5细胞因子：与假手术组相比,模型组大鼠血清中IL-1p、IL-2、IL-6、TNF-a和ET-1的表达均显著升高(P<0.01),NO表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,中药治疗各组均出现不同程度的变化,中药大剂量组和西药组中大鼠血清中IL-1p、IL-2、IL-6、TNF-α、ET-1的表达均下降显著(P<0.01),NO表达显著增加(P<0.01)。中药中剂量组的IL-1β和TNF-α出现显著下降(P<0.01)。6蛋白表达：与假手术组大鼠相比,模型组大鼠的VEGF及其受体Flk-1,5-HT1AR的表达水平均升高(P<0.01),而5-HT2AR的显著下降(P<0.01)；与模型组比较,中药大剂量组、西药氟西汀组能升高VEGF及其受体Flk-1,5-HT1AR的表达水平并降低5-HT2AR表达(P<0.01),作用明显；中药中剂量组可显著升高VEGF、Flk-1的表达(P<0.01),升高5-HT1AR的表达(P<0.05),显著降低5-HT2AR的表达(P<0.01)；而小剂量组则可以显著升高Flk-1的表达(P<0.01),显著降低5-HT2AR的表达(P<0.01),升高VEGF的表达(P<0.05)。7基因表达：与模型组相比,假手术组、中药大剂量组、中药中剂量组、西药组的VEGF及其受体Flk-1、5-HTIAR的基因表达均较高,而5-HT2AR的基因表达较模型组低；中药小剂量组的各个指标也有改变,但并不显著。结论：1LBCCA叠加CUMS结合单笼饲养建立血管性抑郁模型可以模拟人类抑郁状态表现的症状：兴趣感下降、快感缺失、探索力下降、运动能力减弱以及脑缺血状态。中药复方开心解郁方及盐酸氟西汀均可改善抑郁状态和慢性脑缺血状态。2血管性抑郁模型大鼠海马CA3区神经元有明显损伤,使用开心解郁方大、中剂量组干预后可显著改善损伤状况。3中药复方开心解郁方可以有效调节调节血管性抑郁模型大鼠血清中炎症细胞因子及血管活性因子的异常表达,其中以中药大剂量组和西药氟西汀效果最为显著。4血管性抑郁模型大鼠VEGF及其受体Flk-1蛋白表达水平显著降低；血管性抑郁模型大鼠5-HT1AR蛋白表达水平显著降低,5-HT2AR蛋白表达水平显著增高；开心解郁方中、大剂量组均可升高VEGF及其受体Flk-1、5-HT1AR的蛋白表达水平并降低5-HT2AR的表达。5血管性抑郁模型大鼠VEGF及其受体Flk-1基因表达水平显著降低；血管性抑郁模型大鼠5-HT1AR基因表达水平显著降低,5-HT2AR基因表达水平显著增高；开心解郁方中、大剂量组、西药组均可升高VEGF及其受体Flk-1、5-HT1AR的基因表达水平并降低5-HT2AR的表达。