论文部分内容阅读
目的：通过体外和体内两个方面分别研究叶酸靶向加载5-FU己内酯聚合药物(5-FU-P(CL-co-MCL)-FA)对SGC-7901人胃腺癌的抗肿瘤作用,并对该药物的体内毒性进行了初步研究。方法：体外实验中复苏及培养SGC-7901人胃癌细胞至对数浓度,用不同浓度的五组药物(P(CL-co-MCL)、P(CL-co-MCL)-FA、5-Fu、5-FU-P(CL-co-MCL)、5-FU-P(CL-co-MCL)-FA)对SGC-7901细胞进行处理,于处理后24h、48h在倒置显微镜下观察肿瘤细胞凋亡的情况：用MTT法测定48h时的吸光度(OD),计算细胞抑制率(IR),半数抑制浓度(IC50)。体内试验中,建立SGC-7901人胃癌裸鼠模型,隔日静脉注射6组药物(5-FU 30mg/kg),分别为5-FU-P(CL-co-MCL)-FA、5-FU-P(CL-co-MCL)、5-Fu、P(CL-co-MCL)、P(CL-co-MCL)-FA、及生理盐水,治疗当日开始隔日测量肿瘤体积及裸鼠重量,并根据公式计算肿瘤生长抑制率(IR)及瘤重抑制率(TIR),12天实验结束时,取血测定血常规和血清生化指标,肿瘤及肝肾组织作病理组织学检查。活体荧光显像观察药物体内分布。结果：MTT结果发现,两种非载药已内酯聚合物(P(CL-co-MCL)、P(CL-co-MCL)-FA)对胃癌细胞不敏感,细胞抑制率<20%。5-Fu组、5-FU-P(CL-co-MCL)组、5-FU-P(CL-co-MCL)-FA组IC50分别为9.83μg/mL、7.53μg/mL、5.60μg/mL。5-FU-P(CL-co-MCL)-FA组对SGC-7901胃癌细胞有明显增殖抑制作用,且较单药5-FU及5-FU-P(CL-co-MCL)效果好,存在一定时间—效应和浓度—效应关系。当浓度为20μg/mL和40μg/mL时,5-FU-P(CL-co-MCL)-FA组与5-FU-P(CL-co-MCL)组(p=0.001)、5-FU组(p=0.000)相比有显著的抑制效果,20μg/mL浓度时5-FU-P(CL-co-MCL)-FA组、5-FU-P(CL-co-MCL)组、5-FU组IR分别为75.0%、68.3%、56.3%；40gg/mL时分别是85.7%、76.6%、69.3%。对裸鼠的一般情况观察发现,与生理盐水组比较,5-Fu组、5-FU-P(CL-co-MCL)组裸鼠体质量下降。5-Fu组、U-P(CL-co-MCL)组、5-FU-P(CL-co-MCL)-FA组与生理盐水组相比,肿瘤生长抑制率(IR)分别为(43.66%,49.41%,75.50%；p=0.000),瘤重抑制率(TIR)分别为44.40%,(p=0.001)；47.57%,(p=0.000)；72.93%,p=0.000)。5-FU-P(CL-co-MCL)-FA组肿瘤体积增长最为缓慢,较5-FU组(p=0.004)、5-FU-P(CL-co-MCL)组(p=0.0017)药物具有更强的抑制肿瘤效果。P(CL-co-MCL)组、P(CL-co-MCL)-FA组与生理盐水组相比无显著性差异(p>0.05)。肿瘤病理组织结果发现,各组肿瘤组织均有不同程度坏死。血常规及血清生化指标提示5-FU组可引起裸鼠血液白细胞(WBC)下降,血清丙氨酸转氨酶(ALT)升高,而5-FU-P(CL-co-MCL)-FA组未出现上述变化。肝肾病理组织检查各组均未见明显肝细胞坏死、门管区炎性细胞浸润及肾小管损伤。活体荧光显像可见荧光物质在靶向载药组移植瘤处明显积聚。结论：叶酸靶向加载5-FU己内酯聚合药物(5-FU-P(CL-co-MCL)-FA)可提高原药5-FU对SGC-7901胃癌细胞的细胞毒作用,具有时间—效应和浓度—效应关系。同时体内实验也证实,5-FU-P(CL-co-MCL)-FA能更高效抑制SGC-7901胃癌生长,并且对裸鼠的体内毒性小于原药5-FU,是一种安全有效的新型载药抗肿瘤制剂,具有良好的临床应用前景。