背景:术后认知功能障碍（postoperative cognitive dysfunction,POCD）是老年患者术后中枢神经系统（central nervous system,CNS）的常见并发症之一。大量文献表明,POCD的发生发展与手术创伤引起的中枢炎症有关。本课题组在前期研究中已明确了脑内肥大细胞（Mast Cells,MCs）在术后急性中枢炎症中的作用。MCs一旦被激活,会发生脱颗粒反应,释放预先储存的炎性介质,如组胺、类胰蛋白酶、肿瘤坏死因子α（Tumor necrosis factorα,TNF-α）等,触发免疫级联反应。在脱颗粒中,组胺是一种强有力的炎症介质。已有研究发现小胶质细胞表达有组胺四类受体亚型。此外,组胺能够激活小胶质细胞以及大量炎症介质的释放。传统观念认为,星形胶质细胞在CNS中仅扮演辅助角色,起支持,提供营养及协助代谢等作用。然而,越来越多的证据表明星形胶质细胞在中枢免疫反应中扮演着积极主动的角色。星形胶质细胞的适度激活能够合成并释放神经营养因子,包括胶质细胞源性神经营养因子（glial cell-derived neurotrophic factor,GDNF）、脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）、神经营养因子3（neurotrophin-3,NT-3）等,共同促进神经元的存活并维持突触稳态。另有研究发现,GDNF还可以抑制小胶质细胞激活进而改善中枢炎症。而另一方面,星形胶质细胞长期过度的激活可导致大量促炎介质的释放,引起神经退行性变、细胞兴奋性中毒与凋亡。然而,星形胶质细胞作为CNS中数量最多和分布最广泛的胶质细胞,组胺对星形胶质细胞免疫反应的调节作用及其机制鲜有报道,需要深入研究。目的:本研究拟在离体条件下鉴定星形胶质细胞上组胺四类受体亚型的表达,继而探讨组胺对星形胶质细胞炎症因子和神经营养因子表达的调控作用及部分机制。方法:1.采用免疫荧光、Western blot和real-time PCR检测原代培养大鼠星形胶质细胞上组胺四类受体亚型的表达。2.采用浓度分别为0.001、0.01、0.1和1μg/ml的组胺刺激星形胶质细胞,24小时后使用免疫荧光和Western blot检测星形胶质细胞活化标记物GFAP的表达。鉴于0.1μg/ml组胺能够明显增加GFAP的表达,Western blot、免疫荧光和real-time PCR被用于检测此时各组胺受体的表达变化量。3.采用浓度分别为0.001、0.01、0.1和1μg/ml的组胺刺激星形胶质细胞24小时;另外,使用浓度0.1μg/ml的组胺分别刺激星形胶质细胞2、6、12、24、48和72小时。ELISA法检测细胞上清中炎症因子TNF-α和IL-1β的释放。在以上结果的基础上,在用浓度为0.1μg/ml的组胺刺激星形胶质细胞前30分钟预先在培养基中分别给予10μM组胺三类受体亚型的拮抗剂,采用ELISA法检测组胺刺激24小时后星形胶质细胞TNF-α和IL-1β的表达量。4.在以上结果的基础上,用0.01和0.1μg/ml的组胺刺激星形胶质细胞6和24小时;另外,在0.1μg/ml的组胺刺激星形胶质细胞前30分钟预先在培养基中分别给予10μM组胺三类受体亚型的拮抗剂;分别采用免疫荧光和Westernblot检测不同情况下GDNF的表达量。实验结果:1.免疫荧光、Western blot和real-time PCR均证实原代培养大鼠星形胶质细胞表达有组胺1受体（H₁R）、组胺2受体（H₂R）和组胺3受体（H₃R）,无组胺4受体（H₄R）表达。2.组胺能够呈剂量依赖性促进星形胶质细胞GFAP的表达（P<0.05）;与对照组相比,组胺（0.1μg/ml）能够明显上调H₁R和H₃R的表达量（P<0.01）,而H₂R表达量仅轻度升高（P<0.05）。3.与对照组相比,组胺能抑制星形胶质细胞TNF-α和IL-1β的表达（P<0.05）;与单独组胺（0.1μg/ml）处理相比,H₁R和H₃R受体拮抗剂预处理能够明显阻断组胺对星形胶质细胞TNF-α和IL-1β表达的下调作用（P<0.01）,而H₂R受体拮抗剂仅能部分阻断该效应（P<0.05）。4.与对照组相比,组胺能够显著增加星形胶质细胞GDNF的表达（P<0.05）;与单独组胺（0.1μg/ml）处理相比,H₁R和H₃R受体拮抗剂预处理能够明显阻断组胺对星形胶质细胞GDNF表达的上调作用（P<0.01）,而H₂R受体拮抗剂仅部分抑制该效应（P<0.05）。结论:星形胶质细胞表达H₁R、H₂R和H₃R,无H₄R表达;三种组胺受体均参与组胺介导的GDNF的上调与TNF-α和IL-1β的下调作用,其中H₁R和H₃R的调节作用强于H₂R。