苯乙酸对C6胶质瘤细胞凋亡的影响及机制研究

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目的:观察诱导分化剂苯乙酸(PA)对C6胶质瘤细胞凋亡的影响,探讨其作用机制。 方法:通过体外培养C6胶质瘤细胞,给予不同浓度的PA(2.5、5.0和7.5mmol/L)分别诱导分化24、48、72和96h,采用MTT比色法检测PA对C6细胞增殖抑制率,采用显微镜和透射电镜观察细胞形态学变化,流式细胞仪(FCM)和TUNEL检测细胞凋亡,免疫组化或原位杂交检测PA对Bcl-2、Bax、survivin、p53和GFAP表达的影响,激光共聚焦显微镜检测PA对细胞内游离Ca2+浓度的影响。并建立wistar大鼠C6胶质瘤动物模型,腹腔注射PA治疗,研究PA对C6胶质瘤细胞凋亡的影响,检测PA对Bcl-2、Bax、survivin、p53和GFAP表达的影响。 结果:体外实验显示:PA显著抑制C6胶质瘤细胞生长,细胞增殖抑制率随PA浓度和作用时间的增加而增加。在PA作用后,透射电镜观察发现凋亡细胞;FCM和TUNEL检测发现:随PA浓度的增加和作用时间的延长,C6胶质瘤细胞凋亡率增加。免疫组化检测发现PA对Bcl-2、p53和survivin表达没有影响,PA能显著增强GFAP和Bax的表达。原位杂交检测PA对Bcl-2表达没有影响,PA能显著增强Bax的表达。PA作用72h后能明显增加细胞内游离Ca2+浓度,并且随药物浓度的增加而增加,与细胞凋亡率的变化一致。 体内实验显示:实验组的生存时间比对照组明显延长,透射电镜观
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