芒果叶活性物质的分离及其抗氧化性研究

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本文以芒果叶为实验原料,主要研究了超声波提取、微波提取、回流提取三种提取方法对金煌芒、四季蜜芒、爱文芒、台农一号芒四个品种芒果叶中的黄酮和多酚含量及其抗氧化活性的影响,采用硅胶柱层析、TLC分离纯化具有较高抗氧化活性的金煌芒与四季蜜芒粗提物,通过HPLC分析这两种芒果叶中具有抗氧化活性的化学成分。主要实验结果如下:1超声波提取的金煌,四季蜜芒,爱文芒,台农一号芒果叶中多酚与黄酮含量最高,其总黄酮含量分别为:(52.27±1.18)mg/mL;(36.53±0.78)mg/mL;(13.10±0.45)mg/mL;(8.21±0.16)mg/mL,其多酚含量分别为(18.78±0.24) mg/mL;(14.58±0.11)mg/mL;(9.24±0.43)mg/mL;(6.71±0.057)mg/mL.2在任一种提取方法中,四个品种芒果叶对·OH及DPPH自由基清除效果为:金煌芒>四季蜜芒>爱文芒>台农一号芒,四个品种芒果叶对两种自由基的清除作用几乎都高于作为对照的同等浓度的Vc溶液。3以芒果叶中总黄酮对自由基清除的IC50值来衡量其对抗氧化性影响时,超声波提取法影响最小,回流提取法影响最大。超声波提取时:金煌、四季蜜芒、爱文芒、台农一号芒对·OH清除的IC50值分别为(0.85±0.014)ug/mL,(0.92±0.014)ug/mL,(1.29±0.04)ug/mL,(1.89±0.07) ug/mL;金煌、四季蜜芒、爱文芒、台农一号芒对DPPH清除的IC50值分别为:(3.84±0.06)ug/mL,(6.99±0.06)ug/mL,(9.42±0.11)ug/mL,(12.24±0.06) ug/mL。回流提取时:金煌,四季蜜芒,爱文芒,台农一号芒对·OH清除的IC50值分别为(0.89±0.028)ug/mL,(1.73±0.04)ug/mL,(1.83±0.04)ug/mL,(2.72±0.01)ug/mL;金煌芒,四季蜜芒,爱文芒,台农一号芒对DPPH清除的IC50值分别为:(5.25±0.08)ug/mL,(7.99±0.01)ug/mL,(10.67±0.15)ug/mL,(12.79±0.14)ug/mL。4通过硅胶柱层析分离组分与特定试剂颜色反应,初步鉴定出金煌芒与四季蜜芒芒果叶中主要的抗氧化作用物质应为黄酮类,二氢黄酮类及含有邻三羟基结构的黄酮类物质,采用石油醚-乙酸乙酯-甲醇-乙酸(1:4:0.5:0.5)(1:5:0.5:0.5)(1:6:0.5:0.5)(1:7:0.5:05)的洗脱剂洗脱样品,金煌芒洗脱后的组分S6及四季蜜芒洗脱后组分J4两种组分中黄酮含量最高,分别为:(22.46±3.42)mg/mL和(10.78±0.19)mg/mL。此时两组分对羟基自由基的清除效果最强,当样液浓度为1.0mg/mL时,清除率分别为98.86%和71.54%。5对金煌芒与四季蜜芒中抗氧化性强的组分进行HPLC分析,结果显示四季蜜芒与金煌芒的分离组分中均含有芒果苷,四季蜜芒分离组分中具有抗氧化作用的物质可能主要为芒果苷,而在金煌芒分离组分中具有抗氧化作用的物质则可能主要为极性略强于芒果苷的槲皮素,山奈酚等物质以及芒果苷。
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