大量实验结果显示：细胞内的活性氧调节细胞死亡的发生，包括细胞凋亡和坏死两种方式。细胞凋亡事件中两条主要的途径是线粒体途径和死亡受体途径，caspases是细胞凋亡的主要执行者，而作为线粒体途径的上游caspase分子-caspalse-9的激活和活性氧有着密切的关系。Caspase-9分子含有13个半胱氨酸，并且其活性依赖其活性中心的半胱氨酸，因此caspase-9成为氧化修饰调节的可能靶点，但是相关的研究报道并不多见。 本研究旨在揭示活性氧介导caspase-9激活的分子机制。文中采用了三个实验模型开展研究：(1)在HeLa细胞整体水平用H2O2诱导细胞氧化应激；(2)Diamide在去线粒体胞浆系统中氧化caspase-9蛋白的巯基；(3)Diamide在凋亡复合体重组系统中氧化caspase-9蛋白的巯基。结果显示：细胞内的氧化状态能够易化caspase-9分子的激活；在细胞水平单独使用H2O2处理能使caspase-9分子发生剪切和激活，同时使caspase-9分子的巯基发生了氧化；用Co-IP和氧化/还原对角线二维电泳两种方法证明H2O2促进了二硫键介导的caspase-9分子和Apaf-1分子的相互作用；直接使用巯基氧化剂diamide也能促进二硫键介导的caspase-9分子和Apaf-1分子的相互作用。在去线粒体胞浆系统中，diamide使caspase-9分子的巯基发生氧化，并且不依赖细胞色素c浓度的增加促进caspase-9的剪切；氧化/还原对角线二维电泳结果提示diamide促进了二硫键介导的caspase-9和Apaf-1的相互作用。最后，使用了更纯化的体外凋亡复合体重组系统证实caspase-9分子的氧化修饰对其剪切有促进作用，并且一定程度的氧化修饰是caspase-9分子激活的必需条件。 研究首次证明：一定水平的活性氧对caspase-9蛋白分子直接的氧化修饰能介导caspase-9蛋白和Apaf-1蛋白的相互作用，进而促进caspase-9的剪切和激活，最终导致凋亡发生。Caspasc-9分子中巯基的一定程度的氧化修饰不但能促进caspase-9分子的激活，甚至是caspase-9分子激活所必需的。我们推测这可能是活性氧促进细胞凋亡的机制之一。通过氨基酸突变实验，初步排除了第12位和76位半胱氨酸参与了氧化修饰介导caspase-9剪切激活的可能性。氧化修饰介导caspase-9激活的半胱氨酸氧化位点有待进一步研究明确。