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第一部分不同前列腺癌细胞株之间Talin-1表达情况和侵袭能力关系目的:通过体外培养不同来源人前列腺癌细胞株(DU-145、PC-3、LNCa P)及人正常前列腺细胞株,检测Talin-1在各细胞株中的表达差异及各细胞株侵袭和迁移能力,探讨Talin-1与不同来源人前列腺癌细胞侵袭及迁移的关系。方法:体外培养人前列腺癌细胞株(DU-145、PC-3、LNCa P细胞株)及人正常前列腺细胞株,传代培养至对数生长期,利用RT-PCR技术检测各细胞株中Talin-1的m RNA表达水平,Western-blot技术检测各细胞株中Talin-1的蛋白表达水平,Transwell侵袭和迁移实验及细胞划痕实验检测各细胞株侵袭及迁移能力,MTT法检测各细胞株增殖能力。结果:与正常人前列腺细胞株相比,在前列腺癌LNCa P细胞株、PC-3细胞株、DU145细胞株中的Talin-1m RNA、蛋白表达水平有差异(P<0.05);其中DU-145、PC-3、LNCa P细胞株中的Talin-1m RNA以及蛋白表达水平依次递减,组间比较均有统计学差异(P<0.05)。与正常人前列腺细胞株相比,在LNCa P细胞株、PC-3细胞株、DU145细胞株的侵袭和迁移能力明显增高(P<0.05),其中DU-145、PC-3、LNCa P细胞株中的迁移、增殖以及侵袭能力依次递减,组间比较均有统计学差异(P<0.05)。结论:1、不同来源的人前列腺癌细胞的侵袭和迁移能力不同;2、不同来源的人前列腺癌细胞株中的Talin-1的表达水平不同;3、Talin-1与前列腺癌的侵袭和迁移能力相关;4、低表达Talin-1的前列腺癌的侵袭和迁移能力低,恶性度低,高表达Talin-1的前列腺癌的侵袭和迁移强,恶性度高;5、Talin-1可作为前列腺癌恶性度的预测指标之一。第二部分沉默Talin-1基因对前列腺癌PC-3细胞株表达和侵袭能力的影响目的:针对前列腺癌PC-3细胞中异常表达的Talin-1基因进行沉默,探讨沉默Talin-1基因后前列腺癌细胞株的侵袭及迁移能力变化,探讨Talin-1作为靶基因进行特异性干扰的可行性。方法:利用RNAi方法,以Talin-1基因为治疗靶点针对前列腺癌PC-3细胞中的Talin-1基因进行基因沉默,同时选取PC-3空白对照组,基因沉默组、基因沉默后加入转化生长因子(TGF-β)组,PC-3加入TGF-β组,利用Western-blot技术检测各细胞株中E-cadherin以及Vimentin的蛋白表达水平,Transwell侵袭和迁移实验及细胞划痕实验检测各细胞株侵袭及迁移能力,MTT法检测各细胞株增殖能力。结果:基因沉默后,PC-3+TGF-β、PC-3、PC-3+TGF-β+RNAi、PC-3+RNAi 4组中E-cadherin蛋白表达水平依次递增,Vimentin蛋白表达水平依次递减以及侵袭、增殖和迁移能力依次递减,4组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:沉默Talin-1基因后前列腺癌PC-3细胞系的增长速度减慢,肿瘤的侵袭和迁移能力下降,其可能机制是通过升高E-cadherin蛋白表达以及降低Vimentin蛋白表达从而诱发EMT表型转化而实现的,本试验可能为后续的以Talin-1为靶点的前列腺癌基因治疗体内实验提供理论依据。