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冠状动脉粥样硬化性心脏病（coronary heart disease,CHD）是人群常见病和多发病,由不良生活习惯、环境与遗传等多方面因素综合所致,是一种多基因遗传性疾病。研究CHD的遗传易感基因对于开展针对性的人群预防,延缓或防止冠心病的发生具有重要的意义。随着分子生物学的迅速发展及人类基因组计划的进行,寻找CHD易感基因并从基因水平阐明CHD发病机制成为医学研究的热点。这些基因中有脂质代谢基因如载脂蛋白E基因、载脂蛋白A基因、载脂蛋白B基因等,有肾素-血管紧张素-醛固酮系统中的血管紧张素Ⅰ转换酶（ACE）和血管紧张素Ⅱ基因等,有纤溶酶原激活物抑制剂（PAI-1）基因,还有内源性基质金属蛋白酶抑制剂（TIMP）基因、内皮型一氧化氮合酶基因、E选择素基因等。研究这些基因与CHD的关系均是从这些基因的基因多态性与CHD的关系着手。人细胞色素酶P450（Cytochrome P450,CYP450）是一组酶系,是重要的人肝脏药物代谢酶,是一组参与涉及到许多外源性物质和内源性物质代谢的酶系。CYP450蛋白由CYP基因超家族编码。这组酶系包括许多家族与亚家族,CYP2C9即是CYP2C亚家族中的一种。CYP2C9酶蛋白分子量约55kD,包含约500个氨基酸残基。CYP2C9蛋白主要分布于肝脏,在小肠、呼吸道、脑、血管和肾脏等其他部位中也有表达,约占总CYP蛋白量的20%。CYP2C9蛋白由CYP2C9基因编码,人CYP2C9基因位于染色体10q24.2上,全长50.71kb,有9个外显子,8个内含子。CYP2C9基因开放读码区存在着多态性,在分子生物学上视为单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）。CYP2C9基因多态性包括以下种类,从CYP2C9*1（野生型）,CYP2C9*2型,CYP2C9*3型,……到CYP2C9*30型等。不同人群中CYP2C9基因变异有不同的分布,在中国人群中,CYP2C9基因型主要为CYP2C9*1（野生型）和CYP2C9*3型（突变型）。突变型CYP2C9*3基因型是第1075位碱基发生了A＞C突变,使得编码多肽链第359位异亮氨酸的密码子ATT突变为亮氨酸密码子CTT。CYP2C9参与多种药物的代谢,其催化的药物种类约占临床常用药物12%。如苯妥英、华法林、甲苯磺丁脲、氯沙坦等。同时CYP2C9还参与了多种外来致癌物和致突变物的代谢,如喹啉、丁二烯。除了外源性物质,CYP2C9在动脉血管细胞中参与了从花生四烯酸（arachidonic acids）合成环氧花生酸（epoxyeicosatrienoic acids,EET）的代谢。EET是一种内皮衍生性超极化因子（endothelium-derived hyperpolarizing factor,EDHF）,在血管平滑肌细胞中,EET能够促进Ca2+的流入,并且能够激活Ca2+依赖的K+-Ca2+离子通道引起超极化,进而引起血管扩张和降低血压,并对血管内皮细胞及平滑肌细胞功能产生影响。血脂作为经肝脏合成、代谢的一种重要内外源性物质,其代谢可能和CYP2C9存在联系。CYP2C9基因多态性引起了个体中CYP2C9蛋白结构的变化,从而引起了蛋白活性的变化,已有的研究表明其突变型蛋白的活性低于野生型。蛋白活性的变化,造成了对某些药物代谢能力遗传性的多态性,携带有突变型基因的个体代谢药物的能力较携带野生型基因个体低。同时,这种多态性造成机体对外来致癌物和致突变物的代谢能力的差异,也会对机体生成EET的能力产生不同影响,如CYP2C9*3突变型个体的CYP2C9酶催化合成EET的能力较CYP2C9*1野生型个体低,进而对某些疾病的发生、发展产生不同影响。这种多态性与某些疾病的发生有相关性,如肺癌和急性心肌梗死。目的1.探讨CYP2C9基因多态性和冠心病间是否存在关系。2.探讨CYP2C9基因多态性和血脂之间是否存在关系及关系如何。对象及方法对象所有研究对象均为我院住院病人,对患者行冠状动脉造影,将冠状动脉狭窄程度≥50%或者有明确的心肌梗死病史者列为冠心病组,而将冠状动脉血管造影正常者列为对照组。所有对象均为汉族,研究个体间无血缘关系,且均排除肝、肾、肿瘤、甲状腺、糖尿病等疾病。冠心病组218例,对照组200例。经统计学分析两组年龄、性别、吸烟率、高血压发生率等条件具有可比性。方法实验对象于服用降脂药物前空腹8小时以上,取静脉血采用标准酶比色法测定总胆固醇（total cholesterol,TC）、甘油三脂（triglyceride,TG）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（highdensity lipoprotein cholesterol,HDL-C）,用免疫浊度法测定载脂蛋白Al（apoAl）和载脂蛋白B（apoB）及脂蛋白（a）。另取5ml静脉血置于EDTA-K2抗凝管按人血液DNA提取试剂盒操作步骤提取白细胞基因组DNA,所提DNA采取聚合酶链反应（PCR）法对CYP2C9基因目的片段进行扩增,PCR产物送上海英骏生物技术有限公司直接测序进行基因型分型。并对所有实验对象中的CYP2C9*3基因型者和与之条件相匹配的相同数量的CYP2C9*1基因型者的血脂水平进行比较。采用两独立样本t检验比较冠心病组和对照组实验对象的年龄差异,四格表资料的x2检验比较冠心病组和对照组的男性百分比、吸烟率、高血压发生率,采用四格表资料的x2检验比较冠心病组和对照组的CYP2C9*3基因型频率及等位基因频率,符合条件的CYP2C9*3基因型者和GYP2C9*1基因型者的血脂水平比较采用两样本t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。结果1.检测到的所有突变型CYP2C9*3基因型均为CYP2C9*1/CYP2C9*3杂合子,未检测到CYP2C9*3/CYP2C9*3型纯合子。2.冠心病组突变型CYP2C9*3基因型检出率为8.26%,高出对照组检出率3.50%,差异有统计学意义（P=0.040）,冠心病组CYP2C9*3等位基因频率4.13%也显著高于对照组1.75%（P=0.044）。3.CYP2C9*3基因型（突变型）者和CYP2C9*1基因型（野生型）者间血脂、脂蛋白水平经统计学比较无显著性差异。结论1.汉族人群中CYP2C9*3基因型突变主要为CYP2C9*1/CYP2C9*3杂合子突变。2.CYP2C9*3突变型基因型在冠心病组检出率高于对照组检出率,差异有统计学意义（P=0.040）。冠心病组CYP2C9*3等位基因频率也显著高于对照组。提示冠心病发病可能和CYP2C9基因多态性有关,即CYP2C9*3突变增加了冠心病的发病危险。3.本研究中未发现CYP2C9基因多态性与血脂间存在显著性关联,虽然CYP2C9*3基因型组与CYP2C9*1基因型组比较,CYP2C9*3基因型组低密度脂蛋白胆固醇和载脂蛋白B有增高趋势,但P＞0.05,需要扩大样本继续观察。