【摘 要】
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本文研究了通过筛选得到的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）WY45产甘露聚糖酶的发酵条件,并对其所产甘露聚糖酶进行了分离纯化,同时对纯酶的酶学性质进行了研究。主要结果有:
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本文研究了通过筛选得到的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）WY45产甘露聚糖酶的发酵条件,并对其所产甘露聚糖酶进行了分离纯化,同时对纯酶的酶学性质进行了研究。主要结果有: 1.枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）WY45液体发酵产生甘露聚糖酶,发酵培养基经优化后,在4%的魔芋精粉为碳源,1.33%的大豆蛋白胨为氮源,初始pH5.5,50℃培养96 h的条件下,该菌产酶的酶活从初始的204 u/ml提高到2800 u/ml,优化提高了13.7倍,优化效果明显,且该酶活水平为现在已报道的同类酶中的最高水平。 2.枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）WY45产甘露聚糖酶经60-90%硫酸铵沉淀,S-100凝胶过滤层析,OSFF离子交换层析等分离纯化步骤后得到电泳纯的纯酶,最终纯化倍数为6.08,酶活回收率为19.80%,经SDS-PAGE电泳测定该酶的分子量为44.47KDa。 3.pH对该甘露聚糖酶活力的影响很大。该酶的最适反应pH为6.0,在5.5-6.5的范围内,酶的相对活力都在80%以上;当pH低于5.0和高于9.0时,活力显著下降。在40℃下,酶在所采用的pH5.0-11.0的范围内都很稳定。该酶的最适反应温度为65℃,大于65℃酶活力即迅速下降,70℃时酶活力水平已低于15%。大多数金属阳离子对该酶活力有提高的作用,特别是Co2+和Ni+。
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