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[研究背景与目的] 肝纤维化是指肝脏炎症或直接毒性损伤后所引起的以肝内过多细胞外基质沉积为特征的一类慢性肝病。研究表明,肝纤维化是可以逆转的病变,但临床上至今缺乏确切有效的抗纤维化药物与方法。近年来研究发现我国的许多中草药具有良好的抗肝纤维化疗效。 本实验用二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化模型,从血清学、组织学、分子生物学等水平系统观察中药复方制剂木苏丸对大鼠肝纤维化的防治作用及其可能的发生机制,并在临床上观察木苏丸对肝硬化患者的治疗作用,为抗肝纤维化治疗研究和临床慢性肝病的防治提供新的选择。 [实验方法] 一、木苏丸对实验性肝纤维化的治疗研究 雄性SD大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,木苏丸组(小、中、大剂量),鳖甲软肝片组。造模方法:每周连续3天,每天腹腔注射二甲基亚硝胺(DMN)溶液1ml/kg体重,共3周。预防实验造模同时每天药物灌胃;治疗实验于造模结束后每天药物灌胃,共4周。观察各组大鼠血清肝功能指标及纤维化指标,肝组织切片HE、VG染色观察大鼠肝脏病理改变,并对肝纤维化程度进行分级,电镜观察肝脏超微结构改变,图像分析仪半定量分析胶原纤维面积,观察肝组织α-平滑肌肌动蛋白表达。 二、木苏丸对实验性肝纤维化影响的作用机制研究 测定血清超氧化物歧化酶、丙二醛变化,免疫组织化学法测定基质金属蛋白酶-2(MMP-2),基质金属蛋白酶组织抑制剂-1表达(TIMP-1);RT-PCR法验证MMP-2,TIMP-1mRNA的基因表达,图象分析系统进