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背景肺癌是当今世界最常见的恶性肿瘤之一,其发生机制迄今仍未清楚。microRNA34a家族是一类高度保守的microRNA家族,是一肿瘤抑制因子,而c-myc是原癌基因myc家族中的一员,也是microRNA34a的靶基因,目前有关rnicroRNA34a/c-myc通路调控在NSCLC组织中的研究罕见报道,为此本课题在前期课题组研究的基础之上,通过运用q RT-PCR及western-blot的方法检钡NSCLC组织,癌旁组织,正常肺组织中microRNA34a, c-myc基因和蛋白的表达,探讨两者之间的关系及对NSCLC产生发展的影响,从而揭示NSCLC发生发展的分子生物学机制。为NSCLC患者的诊断与基因治疗提供新途径。目的本课题利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测rnicroRNA34a mRNA及c-myc mRNA、免疫印迹western-blot法检测c-myc蛋白在正常组织及非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer NSCLC)组织中的表达水平,探讨microRNA34a及c-myc之间调控机制以及两者与NSCLC发生发展之间的关系。方法所有标本均来自于2012年4月到2013年6月间,新乡市中心医院病理科、解放军第371医院检验病理科手术切除的24例肺癌组织、12例癌旁组织及12例正常组织做对照。取NSCLC组织、癌旁组织(癌组织以外3-5cm)及正常肺组织均为新鲜组织标本,置于-80℃冰箱或液氮中保存。NSCLC组织、癌旁组织和正常肺组织均经过病理诊断与分型,所收集癌组织病人不包括复发的NSCLC患者,或者手术前经过化学治疗的NSCLC患者。采用q RT-PCR方法检测microRNA34a及c-myc基因表达情况,免疫印迹Western-blot法检测c-myc蛋白的表达情况,用统计软件Graphpad5.0进行t检验及单因素方差分析等相关统计分析。结果1.24例NSCLC组织中,16例为鳞状细胞癌,8例为腺癌；12例癌旁组织,从形态学上为基本正常肺组织；12例正常肺组织。2. q RT-PCR检测microRNA34a mRNA结果显示：在正常组织中为0.918±0.096；癌旁组织为0.172±0.040; NSCLC组织为0.044±0.0310。NSCLC组织中的表达量明显低于正常组织(P<0.01)。实验组与对照组之间存在显著性差异(P<0.01),实验组组内也存在显著性差异(P<0.01)。3. q RT-PCR方法检测c-myc基因的结果显示：在正常组织中为0.364±0.086,癌旁组织中为0.713±0.095, NSCLC组织中为1.431±0.150,实验组与对照组之间存在显著性差异(P<0.01),实验组组内也存在显著性差异(P<0.01)4.蛋白印记技术Western-blot方法检测c-myc蛋白显示:c-myc蛋白在正常组织中为34.35±4.869,癌旁组织中为68.12±7.398, NSCLC组织中为107.9±1.694, NSCLC组织与癌旁组织中存在显著性差异(P<0.01),癌旁组织与正常组织中也存在显著性差异(P<0.01)。实验组组间存在显著性差异(P<0.01)。5. microRNA34a, c-myc基因及蛋白表达之间相关性分析,q RT-PCR方法检测microRNA34a和c-myc基因的表达结果显示,在NSCLC各阶段组织中二者呈负相关。microRNA34a基因与c-myc蛋白之间也呈负相关。c-myc基因和c-myc蛋白之间呈正相关,符合一致性分析。结论1.在NSCLC发生发展过程中microRNA34a与c-myc二者呈负相关性。并与NSCLC的发生与演进有着密切的内在联系。2.在NSCLC组织中出现microRNA34a/c-myc的环路异常调控,为临床NSCLC治疗提供新的途径和思路。