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目的:阐明mi R-26b过表达对脂肪细胞胰岛素敏感性调控的分子机制。方法:1.高脂饮食喂养SD大鼠,建立饮食诱导肥胖(Diet-induced obesity,DIO)大鼠模型。高糖、高胰岛素环境下诱导建立3T3-L1/HPA-v胰岛素抵抗脂肪细胞模型;2.采用Real time PCR技术,检测动物及细胞模型中mi R-26b的表达;3.胰岛素(Insulin)、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(3-isobutyl-1-methyxanthine,MIX)、地塞米松(Dexamethasone,Dex)混合诱导剂诱导3T3-L1前体脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞。胰岛素、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、地塞米松和罗格列酮(rosiglitazone)混合诱导剂诱导HPA-v前体脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞;4.构建mi R-26b过表达慢病毒表达载体,感染人成熟脂肪细胞;48h后在荧光显微镜下,判断病毒感染的效率;5.采用同位素标记葡萄糖进行糖摄取实验,检测胰岛素刺激下脂肪细胞对葡萄糖摄取量的变化;6.Western Blot技术,检测PI3K信号通路中关键蛋白分子胰岛素受体(insulin recepor,IR)、胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRS)、AKT、p-AKT、葡萄糖转运体-4(Glucose transporter type 4,GLUT4)的表达及GLUT4膜蛋白(m GLUT4)的含量;7.生物信息学预测mi R-26b的靶标,采用荧光素酶报告实验进行靶标验证。结果:1.高脂饮食诱导后SD大鼠出现肥胖及代谢紊乱的特征,成功构建DIO大鼠模型。DIO大鼠肠系膜脂肪组织中mi R-26b的表达水平下降,且与应用稳态模型评估的胰岛素抵抗指数(Homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR)呈显著负相关;2.胰岛素抵抗细胞模型中mi R-26b的表达水平显著降低;3.mi R-26b过表达促进脂肪细胞胰岛素刺激下的葡萄糖摄取;4.mi R-26b过表达可以显著上调脂肪细胞胰岛素刺激下的m GLUT4含量;5.mi R-26b过表达可以显著提高磷脂酰肌醇激酶3(phosphatidylinositol3-kinase,PI3K)胰岛素信号通路中p-AKT水平;6.荧光素酶实验的结果表明,第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10,PTEN)为mi R-26b的直接靶基因。结论:mi R-26b可能通过调控PTEN的表达,影响PI3K胰岛素信号通路的正常传导,参与肥胖相关脂肪细胞胰岛素抵抗发生的分子机制。