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阿霉素是目前临床上常用的一种高效广谱的蒽环类抗肿瘤药物,其具有显著剂量-效应关系,但是阿霉素的使用会带来许多不良反应,其中最主要的就是心脏毒性,心脏毒性的存在使阿霉素的临床使用受到了限制。近年来有关阿霉素心脏毒性的研究已经取得了许多进展,但有关其导致心脏毒性的机制尚为完全阐明,另外,有关心脏毒性的治疗方面目前仍无较为有效的策略。银杏内酯B(BN52021)是一种从银杏叶中提取的具有生物活性的成分,前面的研究发现其能够有效的拮抗血小板活化因子的活性,并且在多种疾病中发挥抗炎性保护效应。目前有关其在心毒性中的研究仍不常见。我们在这里推测其对心脏毒性具有保护作用。本文将通过建立小鼠急性心毒性模型和小鼠心肌细胞模型来验证BN52021对心脏毒性的保护机制并阐明相关的作用机制。目的:探索和建立一种成功率高的小鼠心毒性模型,明确BN52021对小鼠心毒性的保护作用。通过体外小鼠心肌细胞心毒性的模型,明确BN52021对心毒性的保护作用的机制。方法:采用一次性腹腔注射DOX15mg/kg诱导急性心毒性模型,给予BN52021灌胃,每天1次,连续5天。7天后观察小鼠体重和生存率的变化和心脏指数(心脏重量和体重的比值)的变化。制作小鼠心脏病理切片,观察小鼠心脏组织学变化。生化手段检测小鼠血清中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)。生化手段检测小鼠心肌组织中还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平。在细胞模型中通过不同浓度的阿霉素及BN52021处理小鼠心肌细胞H9c2,MTT法分析心肌细胞活性;TUNEL法检测心肌细胞凋亡;JC-1荧光标记法检测心肌细胞线粒体膜电位变化;DCFH-DA荧光标记法检测氧自由基;Western-blot检测凋亡蛋白(Caspase-3和Cyto-cytochrome c)的表达水平;Fluo-3AM荧光探针检测心肌细胞胞内钙离子水平。Western-blot分析丝裂原蛋白激酶p38磷酸化情况,同时结合p38抑制SB203580和钙离子拮抗剂BATPA/AM处理分析这些通路活化对心肌细胞活性和凋亡的影响。结果:相比于对照组小鼠,DOX组小鼠的体重明显减轻(p<0.01)。在心毒性诱导7天后,对照小鼠和DOX小鼠的在心脏指数上并无显著差异。然而,相比于对照组小鼠,DOX组小鼠的存活率显著降低(p<0.05)。DOX处理后7天,血清LDH检测结果显示,DOX组出现显著升高。血清CK水平也出现显著升高。小鼠心肌组织中GSH和MDA水平也发生显著的改变现象。相比于DOX小鼠,BN52021治疗组小鼠的体重在心脏指数上有所增加,但并无显著差异。相比于DOX小鼠,BN52021治疗组小鼠的存活率有增高趋势,但无统计学意义。DOX处理后7天,血清LDH水平和血清CK水平检测结果显示,BN52021治疗组小鼠相比DOX组出现显著升高。另外,BN52021治疗组小鼠相比DOX组小鼠心肌组织中GSH水平增高和MDA水平降低。在采用BN52021预处理的心肌细胞中,细胞活性显著升高;细胞凋亡显著下降。JC-1法检测BN52021可显著减轻DOX导致的心肌细胞线粒体膜电位降低。DCFH-DA法检测结果显示BN52021预处理可显著降低DOX引起的氧自由基水平升高。Western-blot的结果显示,BN52021可抑制DOX引起的心肌细胞Caspase-3、Cytochrome c蛋白水平的升高。此外,Fluo-3AM法结果显示BN52021预处理还可显著抑制心肌细胞胞内钙离子水平升高的现象。Western-blot分析丝裂原蛋白激酶p38磷酸化显示BN52021预处理能够显著降低阿霉素引起的p38磷酸化水平升高。p38抑制剂SB203580和钙离子拮抗剂BATPA/AM预处理能够显著升高对心肌细胞活性和降低心肌细胞凋亡。结论:采用一次性腹腔注射DOX15mg/kg能够在小鼠中成功诱导急性心毒性模型。BN52021治疗对心毒性可能具有保护作用。BN52021对心毒性的保护作用主要表现在提高细胞活性、降低细胞凋亡、提高线粒体膜电位、降低氧自由基水平、降低细胞凋亡蛋白的水平和抑制心肌细胞胞内钙离子升高。