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目的:探讨长链非编码RNA BCAR4在人乳腺癌细胞系及血浆中的表达情况及意义,长链非编码RNA BCAR4对乳腺癌增殖及侵袭迁移能力的影响以及长链非编码RNA BCAR4对乳腺癌增殖及侵袭迁移能力影响可能的分子机制。方法:1.通过qRT-PCR的实验方法检测160例血浆标本(包含80例未经治疗的乳腺癌患者,80例健康志愿者)中BCAR4的表达量;2.通过qRT-PCR的实验方法检测各乳腺癌细胞系及人正常乳腺上皮细胞HBL-100中BCAR4的表达量;3.使用si-BCAR4转染乳腺癌细胞,抑制BCAR4的表达后进行平板克隆形成实验及划痕实验;4.运用生物信息学预测软件miRDB、starbase3.0v、TargetScan等预测可与BCAR4结合的miRNA及该miRNA的靶基因,并检测未经治疗的乳腺癌患者和健康志愿者血浆中miR-644a的表达情况;5.双荧光素酶报告基因实验检验BCAR4与miR-644a的关系以及miR-644a与靶基因CCR7的关系;6.共转实验验证猜想,BCAR4是否作为ceRNA作用与miR-644a从而影响其靶基因CCR7参与调控乳腺癌的增殖迁移。结果:1.乳腺癌患者血浆中的BCAR4含量明显高于健康对照人群的血浆中含量。并且BCAR4的表达与乳腺癌的分期有明显联系,具体表现为晚期乳腺癌患者血浆中表达量高于早期患者。此外,同一病人术后血浆中BCAR4的表达量较术前明显降低;2.在5种乳腺癌细胞系中BCAR4的表达量均高于HBL-100细胞。且人乳腺癌细胞MDA-MB-231及MCF-7中表达量最高;3.在转染了si-BCAR4,敲低了BCAR4的表达后,细胞成活并形成克隆的数量明显减少,划痕的愈合率明显降低,乳腺癌细胞增殖速度下降,迁移能力降低;4.软件预测综合分析得出miR-644a与BCAR4有一个结合位点,且乳腺癌患者血浆中的miR-644a含量明显低于正常健康对照人群,5种乳腺癌细胞系中miR-644a的表达量也都低于HBL-100细胞,血浆结果与细胞系结果一致;5.双荧光素酶报告基因实验验证BCAR4与miR-644a可直接结合,同时miR-644a与靶基因CCR7也可直接结合,且两两结合的结合位点完全相同;6.共转实验验证BCAR4通过与miR-644a竞争性结合而释放更多游离的CCR7,参与并促进乳腺癌的增殖和迁移能力。结论:综上所述,本研究表明LncRNA BCAR4在乳腺癌患者血浆内以及乳腺癌细胞内均有较高的表达量。BCAR4作为乳腺癌的一个促癌基因,会通过与miR-644a的直接结合作用,竞争性结合占据miR-644a与其靶基因CCR7的结合位点,使得未能与miR-644a结合的,游离的CCR7增多。即非编码RNA BCAR4通过BCAR4—miR-644a—CCR7的轴,参与到乳腺癌的增殖及迁移之中,促进乳腺癌的发生发展。因此BCAR4与乳腺癌密切相关,具有成为乳腺癌患者的早期诊断与预后判断标志物及治疗靶点的可能性。