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目的：运用shRNA技术，敲低鼻咽癌候选基因STGC3在永生化人鼻咽上皮细胞系NP69的表达，分析STGC3基因表达降低，对NP69细胞系生长、增殖、侵袭、迁移及裸鼠成瘤能力的影响，为揭示STGC3基因在鼻咽癌发病中的作用提供强有力的实验依据。方法：设计与构建STGC3基因的特异性shRNA真核表达载体pRNAT-U6.1/shRNA/STGC3，转染永生化人鼻咽上皮细胞系NP69， G418筛选，建立pRNAT-U6.1/shRNA/STGC3/NP69细胞系，采用荧光显微镜，通过观察转染细胞GFP表达，评价转染效果；RT-PCR技术，检测转染细胞中STGC3基因mRNA的表达水平；通过细胞生长曲线的绘制、细胞集落形成实验及FCM技术，分析STGC3基因表达降低，对NP69细胞生长、增殖及周期分布的影响；施用Transwell侵袭迁移实验，观察转染细胞侵袭与迁移能力；运用裸鼠成瘤实验，观察pRNAT-U6.1/shRNA/STGC3/NP69细胞的成瘤能力。结果：构建真核表达载体pRNAT-U6.1/shRNA/STGC3，经双酶切、测序鉴定、blast比对及RT-PCR鉴定，确定pRNAT-U6.1/shRNA/STGC3真核表达载体成功构建。将pRNAT-U6.1/scramble和pRNAT-U6.1/shRNA/STGC3重组质粒分别转染NP69细胞系，荧光显微镜观察GFP表达，以可见绿色荧光，确定pRNAT-U6.1/scramble、pRNAT-U6.1/shRNA/STGC3导入NP69细胞；RT-PCR验证转染结果；结果表明pRNAT-U6.1/shRNA/STGC3导入NP69细胞，可显著降低STGC3基因在NP69细胞系中的表达。通过细胞生长曲线的绘制、FCM分析，转pRNAT-U6.1/shRNA/STGC3/NP69组细胞生长增殖速度加快；细胞群体中G2期和S期的细胞数目增加，与对照组比较差异具有显著性意义(p<0.05)。细胞集落形成实验结果显示，pRNAT-U6.1/shRNA/STGC3/NP69细胞的克隆形成能力增强，所形成的细胞集落数目多，体积大（p<0.01）。Transwell侵袭转移实验结果显示：与对照组细胞相比，pRNAT-U6.1/shRNA/STGC3/NP69细胞的侵袭能力增强（p<0.001）。将pRNAT-U6.1/shRNA/STGC3/NP69、pRNAT-U6.1/scramble/NP69及NP69三组细胞，分别接种于裸鼠皮下，经8周饲养，均未见肿瘤的形成。结论1.真核表达载体pRNAT-U6.1/shRNA/STGC3，能有效降低STGC3基因在NP69细胞中的表达。2.下调STGC3基因在NP69细胞中的表达，其生长增殖速度加快，呈现部分恶性转化现象，但不足以在裸鼠体内成瘤。