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肾间质纤维化(renal interstitium fibrosis，RIF)是多种原因所致的肾脏疾病发展至终末期的共同病理表现，是以大量细胞外基质(extracellular matrix，ECM)在肾间质的过度沉积为主要特征。研究表明肾功能受损与小管间质损伤密切相关，其影响程度大于肾小球病变程度的影响。基质金属蛋白酶(marixmetalloproteinases，MMPs)是ECM蛋白降解酶的一种，是调节ECM动态平衡的重要酶类，金属蛋白酶组织抑制物(tissue inhibitor of metalloproteinases，TIMPs)为MMPs特异性抑制因子。MMPs/TIMPs比例失衡导致了小管间质ECM转换失衡，故调节两者比例平衡是延缓肾纤维化的重要手段之一。
温阳活血方是由肉苁蓉、仙灵脾、红花、桃仁、丹皮等组成，具有温肾壮阳，活血化瘀之效，临床证明该方对于防治肾小管间质纤维化，保护。肾功能起有益作用。为了探讨该方对RIF的治疗作用，我们以单侧输尿管梗阻(unilateral ureteralobstruction，UUO)诱导的RIF大鼠模型，研究ECM的降解与小管间质损害的关系并观察该方对肾脏组织中基质金属蛋白酶-3(marix metalloproteinases-3，MMP-3)、金属蛋白酶组织抑制物-1(tissue inhibitor of metalloproteinases-1，TIMP-1)、纤维连接蛋白(fibronectin，FN)及肾小管标志蛋白表达的影响，以期为临床防治肾纤维化提供科学的实验依据。主要研究内容概括如下：
1．MMP-3、TIMP-1与肾问质纤维化的相关性研究材料与方法：健康雄性Wistar大鼠32只，体重为150～200克。随机将大鼠分为假手术组(n=8)和造模组(n=24)两组，再将造模后大鼠随机分为3组：UUO 7天组(n=8)、UUO 14天组(n=8)、UUO 21天组(n=8)，造模组行左侧输尿管结扎。于实验第7天、14天、21天分别杀检，观察uuo术后各时相点肾小管间质病理改变及MMP-3、FIMP-1、FN的表达部位、变化情况及与小管间质损害的关系。结果与讨论：发现随着梗阻时间的延长，肾小管间质中炎症细胞浸润逐渐增多，并出现肾小管上皮细胞水肿、变性、坏死，肾小管扩张，间质间隙增宽，成纤维细胞增殖，纤维化程度呈进行性增加。
MMP-3、TMP-1主要分布于肾小管上皮细胞胞浆中，间质细胞中亦有表达；FN主要分布于。肾小管周围和肾间质基质中，在小血管周围和管壁中也有表达。随着梗阻时间的延长MMP-3的表达量先增高，14～21天逐渐降低至假手术组水平，TIMP-1、FN的表达量显著增高，MMP-3/TIMP-1比例呈下降趋势；TIMP-1、FN的表达与肾小管间质纤维化程度成正相关，MMP-3/TIMP-1与肾小管间质纤维化程度成负相关。
2．温阳活血方对肾间质MMP-3、TIMP-1、FN影响的实验研究材料与方法：雄性Wistar大鼠32只，体重为150～200克。随机将实验大鼠分为假手术组(n=8)和造模组(n=24)两组，再将造模后动物随机分为3组：温阳活血治疗组(n=8)、蒙诺治疗组(n=8)、UUO模型组(n=8)(即第一部分UUO14天组)。各造模组予手术后24小时开始灌胃给药，分别于术后14天杀检。观察各组大鼠。肾脏病理改变、MMP-3、TIMP-1、FN在肾小管间质的表达以及肾功能、肾小管标志蛋白表达的变化。
结果与讨论：发现假手术组肾脏未见病理改变，模型组可见肾小管上皮细胞大量萎缩、空泡变性，皮质和近髓萎缩肾小管较多，间质内大量炎性细胞浸润，并出现间质纤维化明显。而蒙诺治疗组、温阳活血治疗组间质内炎细胞呈小灶性浸润，肾小管上皮细胞变性萎缩及问质纤维化范围比UUo模型组小。假手术组中MMP-3有少量表达，造模各组MMP-3的表达均高于假手术组，温阳活血治疗组和蒙诺治疗组的表达水平明显高于模型组，而温阳活血治疗组与蒙诺治疗组两者无明显差异；TIMP-1、FN在假手术组仅有少量表达，造模各组均有不同程度的表达，与假手术组相比造模各组的表达水平均明显增高，温阳活血治疗组、蒙诺治疗组较之模型组表达水平明显降低，TIMP-1的表达在温阳活血治疗组与蒙诺治疗组间无明显差异，但蒙诺治疗组FN的表达低于温阳活血治疗组。造模各组尿素氮、尿视黄醇结合蛋白(retinol binding protein，RBP)水平均有增高，其中模型组与假手术组相比有显著性差异。温阳活血治疗组和蒙诺组与UUO模型组相比有明显降低，温阳活血治疗组和蒙诺治疗组间无明显差异。各组肌酐水平无明显差异。
结论：通过以上研究发现随着梗阻时间的延长，MMP-3表达先增多，14～21天逐渐降低至假手术组水平，TIMP-1、FN表达逐渐增多，MMP-3/TIMP-1比例呈下降趋势；TIMP-1、FN的表达与。肾小管问质纤维化程度成正相关，MMP-3/TIMP-1与肾小管间质纤维化程度成负相关。MMP-3/TIMP-1比例失衡是肾间质纤维化发展的重要原因，而温阳活血方可显著恢复MMP-3表达水平，降低TIMP-1、FN的表达水平，以此来调节MMP-3/TIMP-1的比值，增加FN的降解，从而减少细胞外基质蛋白的沉积，延缓肾小管间质纤维化的进展。