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鼻咽癌的发生与EBV裂解复制相关,在血清中EBV拷贝数高于对照组,而在外周循环血细胞中EBV的拷贝数与鼻咽癌的关系如何?为解决上述科学问题,我们首次应用荧光定量PCR方法,进行鼻咽癌患者外周血细胞内EBV拷贝数检测.首次发现并证实在鼻咽癌外周血细胞内EBV拷贝数低于正常对照人群.这是否可认为:EB病毒发生了裂解复制,破坏了宿主B细胞,导致携带病毒的B细胞减少,并使血浆中的流离EBV拷贝数增加;同时上皮细胞内病毒的裂解复制也促进了鼻咽癌的发生.对这一假说,还需进一步的工作加以证实.总之,结合已有的研究成果,我们证实鼻咽癌存在EBV潜伏感染与裂解感染两种状态.在鼻咽癌组与对照组中均发现两例拷贝较高者,拷贝数达10<5>拷贝/μg DNA以上,尤其在鼻咽癌组中两例较其平均值高了一个数量级.对此极高拷贝者是否说明其恶性程度较低?或有较好的预后?仍需我们进行进一步的分析.根据以上的研究进展,我们首次将FR序列与BZLF1基因联合应用于EBV阳性肿瘤的治疗中.我们的实验从EBV阳性鼻咽癌肿瘤细胞系5-8F与EBV阴性鼻咽癌肿瘤细胞系HNE3着手.通过Western blot方法检测EBV裂解复制相关蛋白Zta、EA-D与gp125的表达,间接证实EBV阳性肿瘤细胞导入FR-BZLF1质粒可诱导EBV阳性肿瘤细胞的特异杀伤.应用Gardella凝胶分析法FR-BZLF1质粒可引发EBV裂解复制.进而,我们应用MTT及细胞集落形成率实验证实导入该治疗质粒具有明显杀伤EBV阳性肿瘤细胞的作用.我们首次将NF-κB抑制剂应用于EBV阳性肿瘤的治疗中.EBV相关肿瘤可分为上皮细胞来源与B细胞来源.因此,我们选用EBV阳性的B细胞来源的B95.8、Raji细胞及上皮来源的5-8F细胞、EBV阴性HNE3细胞为材料,分别应用Bay 11-7082、Z-LLF-CHO及阿斯匹林抑制NF-κB活性,研究抑制NF-κB活性用于EBV阳性肿瘤治疗的可行性.我们通过多种策略诱导EBV裂解复制,达到了特异杀伤EBV阳性肿瘤细胞的目的.在加用GCV后,作用更为明显,而且发现该策略具有较高的靶向特异性.因此,该实验首次从新的视角探讨了EBV为靶的治疗策略,为EBV相关的肿瘤治疗奠定了实验基础.