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自20世纪80年代初野尻霉素作为抗生素从链霉菌中得到,人类就开始了对做为吡啶类生物碱的DNJ进行了大量研究工作。DNJ也存在于其他植物、微生物及蚕体中,自然界以桑树中含量最高。由商务部统计可知,2013年,全国桑园面积1251万亩,桑蚕产量64.7万吨,我国具有广阔的蚕桑资源。蚕桑中的DNJ是一种亚氨基糖(多羟基生物碱)类的天然α-葡萄糖甘酶抑制剂,在机体糖代谢中具有较强的糖苷酶抑制作用,因而表现出诸多的药理活性。DNJ是目前糖尿病治疗药物中唯一国际公认的零伤害生物制剂,但DNJ对肿瘤细胞生长的抑制作用和高效生物制剂的制备仍在探讨、研发中,还需要不断地进行相关实验。为了进一步探讨DNJ的生物医学功能,本论文将研究DNJ对肿瘤细胞体外生长和转移活性的影响,DNJ对小鼠急性毒性及DNJ对体内肿瘤进展的影响,以寻找一种潜在的抗肿瘤药物。基于此,本论文首先通过对体外培养的胰腺癌SW1990细胞经不同浓度的DNJ处理,研究了DNJ对肿瘤细胞增殖、凋亡、细胞周期及其转移活性的影响,同时检测了一些与肿瘤细胞转移活性相关蛋白表达情况,而后通过灌胃高剂量DNJ研究了其小鼠的急性毒性作用,最后建立了荷瘤裸鼠模型和小鼠肺转移模型,以此研究DNJ在体内对肿瘤进展的影响,具体内容和结果如下:1、通过不同浓度的DNJ培养液,在体外对人胰腺癌SW1990细胞进行培养,并从细胞形态、增殖、凋亡和周期等方面探索了DNJ对人胰腺癌SW1990细胞生长的抑制作用。结果表明,DNJ能一定程度抑制SW1990细胞的生长,这种抑制作用呈浓度和时间依存性;DNJ对SW1990细胞生长的抑制作用,体现在DNJ浓度为1000μM时能一定程度抑制SW1990细胞的增殖,并且调节细胞周期,使细胞周期阻滞在G1期,从而促进肿瘤细胞的凋亡。2、胰腺癌SW1990细胞经不同浓度的DNJ处理后,通过流式细胞术检测了DNJ对肿瘤细胞内Ca2+浓度及细胞表面糖链的影响。结果表明,DNJ能够显著抑制肿瘤细胞内Ca2+浓度,明显降低细胞表面α-2,6-唾液酸残基和α-1,6-岩藻糖残基糖基化水平。3、胰腺癌SW1990细胞经不同浓度的DNJ处理后,检测了肿瘤细胞粘附和侵袭活性,同时通过明胶酶谱和Western blot检测了肿瘤细胞转移相关蛋白活性和表达情况。结果表明,DNJ能够显著抑制肿瘤细胞对细胞外基质的粘附能力及其转移侵袭能力,DNJ能够抑制MMP-2和MMP-9的活性和蛋白表达,促进E-cad的表达,同时还能抑制COX-2、NF-κB及STAT-3的表达,从而表现出抑制肿瘤细胞转移的能力。4、通过4h内连续两次对小鼠灌胃3000mg/kg DNJ,研究了DNJ对BALB/c小鼠的急性毒性作用。观测了小鼠体征状态、体重、血常规、肝肾功及尸体的解剖组织学检查等,结果表明,灌胃DNJ后小鼠各指标与空白对照组相比均无显著性差异,根据化合物经口急性毒性标准判定DNJ属于低毒或无毒级别。5、实验采用在裸鼠背部皮下接种SW1900细胞,建立胰腺癌荷瘤裸鼠模型。分别以腹腔注射生理盐水、DNJ和5-Fu。从裸鼠体重、移植瘤体积变化、抑瘤率、肿瘤指数等指标,初步探索了DNJ对荷瘤裸鼠模型皮下移植瘤生长的影响作用。结果表明,与生理盐水组相比,DNJ能够抑制人胰腺癌裸鼠皮下移植瘤的生长。6、实验通过裸鼠和C57小鼠尾静脉接种肿瘤细胞B16-F10,建立小鼠肺转移模型。分别以腹腔注射生理盐水、拜糖平、达卡巴嗪,DNJ低、中、高3个剂量组。从小鼠体重、肺部转移灶数量、小鼠肺重量等指标,初步探索了DNJ对B16-F10在两种不同小鼠肺部转移的影响作用。结果表明,与生理盐水组相比,DNJ能够显著抑制B16-F10肺转移。