H9N2亚型禽流感病毒的广泛流行与频繁的变异重组，不但对养殖行业造成了重大的经济损失，而且已经威胁到了人类身体健康与生命安全。在1994年，我国从广东地区分离得到第一株H9N2亚型禽流感病毒，此后，H9N2亚型禽流感病毒迅速向临近省份蔓延。本研究在山东地区开展了H9N2亚型禽流感分子流行病学调查工作并研究了鸡干扰素α和白介素18对H9N2亚型禽流感病毒的抗病毒作用。本研究对2012年实验室分离鉴定的3株鸡源H9N2亚型禽流感进行生物学特性研究。3株病毒在SPF鸡胚上增值一代后，其HA效价在2⁷～2⁹之间，EID50在10^-7.75/0.1mL～10^-8.5/0.1mL之间，TCID₅₀在10^-8.00/0.1mL¹0^-8.50/0.1mL之间。根据GenBank公布的H9N2亚型禽流感病毒（AIV）的全基因序列设计引物，并进行RT-PCR扩增，PCR产物送测序公司测序，完成3株山东地方分离株CK/SD/SG/2012、CK/SD/JN/2012、CK/SD/SG/2012的全基因序列测序,并对3株H9N2病毒的8个基因片段（PB2，PB1，PA，HA，NP，NA，M和NS）分别进行遗传进化分析，作出系统进化树。8个基因进化树中，3株病毒都处在同一个进化位置，都属于CK/SH/Y2/2008-like谱系，因此，推测三个H9N2分离株可能来源于CK/SH/Y2/2008-like。本研究利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,将编码干扰素α（mChIFN-α）和鸡白介素18（mChIL-18）成熟蛋白基因插入pFastBacDual双向表达载体中，分别置于PH和P10启动子控制之下，引入了蜂素信号肽（honeybee melittin signal peptide, HBM）基因取代鸡干扰素α和及白介素18原有信号肽基因从而实现分泌型表达，为了可以纯化蛋白在两个基因C端分别融合了6个组氨酸标签，将构建成功的质粒转化DH10感受态细胞中进行同源重组，从而获得重组穿梭质粒Bacmid，转染对数生长期的Sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒。重组杆状病毒感染昆虫细胞，鉴定重组蛋白的活性，并且在MDCK细胞上验证了重组的干扰素α和白介素18对于H9N2亚型禽流感病毒的抑制效果，为研究细胞因子防治禽流感打下良好的基础。