拟南芥生长素合成YUCCA基因参与调控雄配子发育的机理研究

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众所周知,生长素参与植物生殖发育的多个过程,包括雄蕊形成,花丝延伸,花粉发育及花药开裂等等。然而,生长素合成在小孢子有丝分裂过程的具体功能并不清楚。YUCCA是依赖于色氨酸生长素合成途径中的关键基因。前人的研究发现yuc2yuc6双突变体表现出雄性不育的缺陷。实验室已有的研究发现该突变体花粉的第一次有丝分裂异常,不能形成正常的生殖核和营养核。我们通过雄配子的传递率分析发现基因型为yuc2/yuc6和YUC2/yuc6花粉的传递效率是相同的。同样的,基因型为yuc2/YUC6和yuc2/yuc6的花粉传递效率也是一样的,这表明YUC2和YUC6对雄配子的调控主要是通过孢子体效应来发挥。与我们的遗传数据相吻合的是我们发现YUC2的蛋白主要定位于孢子体组织——绒毡层中。为了探究yuc2yuc6双突变体中生长素的响应情况,我们通过杂交将DR5::GFP导入突变体中,并比较突变体与野生型中GFP信号的积累情况。在野生型植株中,生长素主要积累在9-12期的花药中,双突变体的花药中检测不到生长素的分布,说明由YUC2和YUC6途径合成的生长素是花药生长素的主要来源。为了弄清生长素控制花粉有丝分裂的调控通路,我们从生长素信号转导通路入手,对一系列arf突变体进行分析:arf2,arf3,arf4,arf9,arf10,arf11,arf16,arf17,arf21,arf10arf16,arf6arf8,发现与yuc2yuc6的表型相似,arf17小孢子的发育也被阻滞在PMI之前的阶段。因此猜测生长素可能通过影响ARF17的活性来调控有丝分裂的相关基因。为了筛选出受YUC2/6-ARF17途径调控的直接下游基因我们从芯片结果分析了7个候选基因,并购买了相应的突变体,通过对这些突变体的表型分析发现他们并不是此途径中的直接下游基因。
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