目的:通过筛选华支睾吸虫成虫cDNA质粒文库，发现并识别未知的全长基因。在此基础上，对新发现的华支睾吸虫磷酸甘油酸激酶同工酶基因进行克隆、表达和纯化分析，并研究其生物学活性：包括免疫原性、免疫反应性，组织分布，酶活性及对肝癌生长的抑制作用。同时研究这两个同工酶在虫体中的差异表达和进化分析，以探讨这两个同工酶在华支睾吸虫中的作用和可能的应用价值。 结论:1.通过筛选华支睾吸虫成虫cDNA文库，获得6个具有完整开放阅读框的全长cDNA序列，经生物信息学分析初步鉴定为华支睾吸虫乙醛脱氢酶基因(CsALDH)，半胱氨酸蛋白酶基因(CsCP)，3-磷酸甘油醛脱氢酶1基因(CsGAPDH1)，3-磷酸甘油醛脱氢酶2基因(CsGAPDH2)，3-磷酸甘油酸激酶1基因(CsPGK1)和3-磷酸甘油酸激酶2基因(CsPGK2)，同时对它们的结构和功能进行了鉴定和预测。2.成功构建了六个原核表达载，成功表达出CsPGK1、CsPGK2、CsCP、CsALDH、CsGAPDH1和CsGAPDH2融合蛋白。并成功纯化出CsPGK1和CsPGK2蛋白。3.纯化的CsPGK1和CsPGK2蛋白均具有磷酸甘油酸激酶的活性，同时它们还具有抑制肝癌肿瘤及腹水的增长，具有潜在的药用价值。4.CsPGK1和CsPGK2在虫体分布广泛，其中以PGK1表达为主，这也证明PGK是华支睾吸虫的重要物质，糖酵解是华支睾吸虫获得能量的重要方式。它们能被病人血清所识别，是潜在的抗原诊断分子。5.PGK序列高度保守，可以用来进行种系发生的研究和物种的分类研究，进化研究表明华支睾吸虫与猫后睾吸虫的亲源关系最近。