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目的:肝纤维化是病毒、药物、酒精、寄生虫、免疫等损伤以及代谢异常引起肝脏慢性炎症发展至肝硬化、肝癌的中间环节,是肝脏组织过度修复导致瘢痕生成的过程。在欧盟,有0.1%人口因肝硬化受到影响,肝组织病理改变严重者,约有17万人口因此而死亡[1]。我国是肝炎大国,肝病是最常见疾病之一,约占总人口10%为乙肝病毒携带者。肝纤维化及肝硬化给社会带来巨大的经济负担,当一般治疗无法满足病情需要时,肝移植成为最后的选择[2]。但供体缺乏,移植费用昂贵及受体体质影响等限制了这一技术的应用。有研究报道,在诱导肝纤维实验过程中,若损伤停止,则肝纤维化可恢复[3]。临床结果显示,一些慢性肝病在控制其病因后肝纤维化表型可自行消退[4]。因而研究肝纤维化形成机制并寻找可逆转此过程的方法有显著的意义。在肝脏受到损伤后,肝星状细胞(HSC)转化为肌成纤维细胞,产生大量细胞外基质。多种细胞信号通路参与了HSC的活化和增殖,其中TGF-β/Smad通路被认为是最主要通路。该通路调节蛋白(Smad ubiquitination regulatory factor2)Smurf2有可能发挥着重要调节作用。有研究表明,Smurf2是TGF-β/Smad通路受体后信号传导蛋白的E3连接酶,将泛素分子特异共价连接到相应底物,通过降解信号蛋白来调节该经典信号通路,发挥抑制肝纤维化的作用。已有研究证实Smurf2可通过泛素化降解Smad7从而调控TGFβ/Smad信号传导[5-6]。这提示Smurf2有可能通过干预TGFβ/Smad信号传导通路影响肝纤维化的进展。本团队前期研究发现1,25(OH)2-D3可抑制HSC增殖,促进凋亡,同时减缓肝纤维化进展[7]。进一步实验发现1,25(OH)2-D3可降低TGF-β1表达[8]。1,25(OH)2-D3是否通过Smurf2来影响TGFβ/Smad通路,为此我们通过观察活性维生素D3作用于肝纤维化大鼠之后检测Smurf2转录及表达水平的变化来探寻其可能存在的机制,为探索肝纤维化发生机制,寻找逆转肝纤维有意义的靶点提供理论依据和实验基础。方法:48只SD大鼠随机分为4组:模型对照组(橄榄油0.3ml/100g,2次/周皮下注射)、模型组(体积比为50%的CCl4橄榄油溶液0.3ml/100g,2次/周皮下注射)、治疗对照组(体积比为50%的CCl4橄榄油溶液0.3ml/100g,2次/周皮下注射+橄榄油0.3ml/100g,1次/天灌胃)、治疗组(体积比为50%的CCl4橄榄油溶液0.3ml/100g,2次/周皮下注射+1,25(OH)2-D3 3ng/100g橄榄油0.3ml/100g,1次/天灌胃)。8周后取肝组织,Masson染色病理切片观察肝组织形态学变化和纤维化程度,采用Western blot检测干预后各组大鼠肝组织Smurf2蛋白表达水平;real time-PCR法检测各组大鼠肝组织中Smurf2 m RNA的含量。数据以(?x±s)表示,检验方法:多组间比较采用单因素方差分析,进一步多重比较应用LSD-t检验,P<0.05认为差异有统计学意义。结果:1.病理示:模型组、治疗对照组肝组织纤维化改变显著,治疗组肝组织纤维化程度较模型组及治疗对照组明显减轻;2.在Smurf2蛋白表达方面:治疗组较模型组、治疗对照组Smurf2蛋白表达升高(P<0.05),差异具有统计意义,治疗组较模型对照组表达降低;3.Smurf2 m RNA表达水平:检测显示治疗组依次高于模型组、模型对照组。结论:1.1,25(OH)2-D3能显著减轻大鼠肝纤维化程度;2.1,25(OH)2-D3治疗组较模型组Smurf2蛋白、Smurf2 m RNA表达均明显升高,提示1,25(OH)2-D3可能通过增强Smurf2基因表达,从而发挥抑制肝纤维化的作用。